En genombredd bindningsscanning för låg spinal benmineraltäthet i en enda utökad familj bekräftar koppling till 1p36.3 | europeisk tidskrift för mänsklig genetik

En genombredd bindningsscanning för låg spinal benmineraltäthet i en enda utökad familj bekräftar koppling till 1p36.3 | europeisk tidskrift för mänsklig genetik

Anonim

Abstrakt

Osteoporotiska frakturer är en ökande orsak till dödlighet och sjuklighet i åldrande populationer. En viktig riskbestämning för dessa frakturer är benmineraldensitet (BMD). Variation på BMD anses, på grundval av tvilling- och familjestudier, vara föremål för en stor mängd genetisk variation och det har antagits att detta kan bero på påverkan av flera gener. Men i familjer som visar segregering av låg eller hög BMD har enstaka större gener visat sig spela en avgörande roll. Vi utförde en genombredd skärm med 380 mikrosatellitmarkörer i en enda utökad familj ( n = 34) där tidigt början BMI med låg ryggmärg segregerar på ett autosomalt dominerande liknande sätt. En tvåpunkts kopplingsanalys utfördes, vilket avslöjade en maximal LOD-poäng på 3, 07 på 1p36.3 (D1S468), vilket bekräftade resultaten från tidigare kopplingsstudier av BMD, medan inga andra suggestiva kopplingstoppar (LOD> 2.2) detekterades någon annanstans i genomet . Mikrosatellitmarkörer genotypades därefter för en ± 6, 9 Mb-region som omger D1S468. Detta avslöjade kritiska rekombinationshändelser som begränsade kandidatregionen till 1, 2 Mb och 19 gener. Sekvensanalys av den kodande regionen hos kandidatgenerna WDR8 och EGFL3 avslöjade inga mutationer eller sjukdomsassocierade polymorfismer. Våra resultat ger några bevis som stöder hypotesen att det finns genetiska determinanter för ryggmärgs-BMD på 1p36.3. Även om ingen specifik sjukdom som orsakar mutation ännu har hittats, öppnar avgränsningen av en relativt liten kandidatregion i en enda utökad familj perspektiv för att identifiera en huvudgen för spinal BMD.

Introduktion

Osteoporos definieras huvudsakligen av en generaliserad minskning av benmineraldensitet (BMD) vilket leder till en ökad risk för sprickor. Bredvid miljöfaktorer, såsom livsstil och kost, bidrar en mängd genetiska faktorer, var och en med relativt blygsamma effekter, till reglering av benmassa. 1 Därför antas BMD bestämmas multifaktorellt. I familje- och tvillingstudier har arvbarhet av BMD beräknats variera från 50 till 90%, med de starkaste ärvningsvärdena som rapporterats för ryggraden. 2, 3, 4, 5, 6 Flera genvarianter och kvantitativa drag loci (QTL) relaterade till BMD har identifierats genom associeringsstudier och genomfattande skanningsmetoder. 7 Replikationen av dessa fynd har emellertid varit mycket inkonsekvent. Det har föreslagits att detta beror på komplexiteten i den genetiska arvet av BMD, etnisk heterogenitet, mångfalden i studieutformningar och användningen av otillräckliga provstorlekar för att ge tillräcklig kraft. 8 Med tanke på dessa förvirrande faktorer kan falska kopplingsresultat genereras över kopplings- och associeringsstudier.

Generellt har genkartläggning varit mycket mer framgångsrik för sällsynta Mendelian-ärvda bensjukdomar både för höga och låga benmassor. I sällsynta fall ärvdes låg BMD faktiskt på ett Mendeliskt sätt. Exempel inkluderar osteogenes imperfecta orsakad av mutationer i en av de två generna som kodar kollagen typ 1 och osteoporos-pseudogliom-syndrom orsakade av inaktiverande mutationer i lipoproteinreceptor-relaterade protein 5-genen. 9, 10 Kartläggningen av kausala gener i dessa sällsynta monogena sjukdomar har bidragit till att identifiera vägar som ligger bakom benmetabolismen och osteoporos som en vanlig sjukdom. Dessutom har flera studier visat bevis för en viktig genmod för arv av BMD. Dessa huvudgener är enkla gener för vilka det finns varianter associerade med en stor effekt på individuell risk och som sådan kan de vara tillräckligt starka för att generera ett detekterbart Mendel-liknande mönster av arv av risk. Detta är särskilt så i stamtavlar som väljs via sond med extremt låga eller höga BMD-värden. 11, 12, 13, 14 Tyvärr är enstaka utvidgade familjer där låg BMD visar ett Mendel-liknande arvsmönster är sällsynta och följaktligen har inte många kopplingsstudier genomförts i sådana familjer.

I denna studie utförde vi en genombredd kopplingsanalys i en enda utvidgad ( n = 34) -familj där segregering av låga ryggmärgs-BMD-värden enligt ett autosomalt dominerande liknande arvssätt gynnar en viktig gen-locus-effekt (figur 1) . Stamtavlan som studerades här fastställdes genom en proband med låg ryggrad BMD och närvaron av återkommande frakturer, där flera släktingar också uppvisade låga BMD-värden. Genom sin stora storlek ger denna familj en möjlighet att kartlägga en viktig gen för osteoporoskänslighet, samtidigt som man undviker problemet med locus heterogenitet som åligger studier som kombinerar data från många små familjer. Dessutom kan man med en sådan familj leta efter rekombinanta haplotyper som definierar ett specifikt genetiskt intervall för ett BMD-lokus.

Image

Stamtavlastruktur som visar haplotyper över kromosom 1p36.3-regionen. Vita symboler representerar "icke-påverkade" individer (Z (aBMD) ≥ − 1), svarta symboler representerar "påverkade" individer (Z (aBMD) ≤ − 2 och / eller behandlade (T) med bisfosfonater på grund av en initial BMD T- poäng ≤ − 2, 5 vid ryggraden och / eller höftet, och grå symboler representerar individer som är kodade som okända på grund av mellanliggande ryggradens BMD-värden (−2

Bild i full storlek

Material och metoder

ämnen

Denna familj kom till läkarvård på grund av förekomsten av återkommande frakturer och låg BMD i individuella II: 16 (figur 1; kompletterande tabell 1). Familjehistoria avslöjade förekomsten av sprickor hos flera familjemedlemmar. Följaktligen genomfördes en omfattande klinisk analys av alla tillgängliga individer i denna familj ( n = 34). BMD mättes med hjälp av dubbel röntgenabsorptiometri (se nedan). För att identifiera sekundära former av osteoporos erhölls data om medicinsk historia, användning av medicinering, alkoholkonsumtion, rökbeteende och historia för frakturer med hjälp av självadministrerade enkäter och fastande blodprov samlades in. 15 Följande uteslutningskriterier tillämpades: en aktuell eller tidigare historia av hypertyreos, metaboliska störningar kända för att påverka ben, försenad pubertet, alkoholism (aktuell eller tidigare alkoholkonsumtion på ≥5 U per dag mer än en gång i veckan), tung rökning (≥ 40 förpackningsår), malabsorption, hemokromatos, nedsatt njur- eller gonadal dysfunktion, malignitet och försökspersoner kroniskt behandlade med glukokortikoider, syntetisk tyroxin eller (anti) androgener. Enligt dessa uteslutningskriterier utesluts individerna II: 6, II: 12 (hypertyreos) och II: 13 (försenad pubertet) (fenotyp "okänd" i kopplingsanalys). Närvaron av en typ I-kollagenmutation, vilket antyder Osteogenesis Imperfecta, eller närvaron av en heterozygot LRP5-mutation, som orsakade låg BMD, utesluts genom mutations- och kopplingsanalys. 16 På grund av en initial BMD-T-poäng ≤ − 2, 5 vid ryggraden och / eller höft, som definieras som osteoporos enligt kriterier från Världshälsoorganisationen, individer II: 5, II: 7, II: 9, II: 16 och II: 18 har fått en specifik osteoporosbehandling med bisfosfonater, vilket i allmänhet kommer att leda till en signifikant ökning av BMD-värden. 17 Inga data om kvantitativa BMD-mätningar innan dessa behandlingar var dock tillgängliga för dessa individer. Studien godkändes av den etiska kommittén vid Ghent University Hospital och skriftligt informerat samtycke erhölls från alla studieämnen.

BMD

Areal BMD (aBMD) (g / cm ^) beräknades utifrån benmineralhalten (g) dividerat med dess projicerade area (cm 2 ). aBMD vid ländryggen (L1 – L4) och höft (femoral hals, trochanter och total höft) mättes med användning av dubbel röntgenstråleabsorptiometri (DXA) med en Hologic QDR 4500C-enhet (mjukvaruversion 8.26a; Hologic Inc., Bedford, MA, USA). Lumbar ryggraden aBMD togs som medelvärdet för L1 – L4-mätningar, såvida inte deformitet var närvarande, i vilket fall medelvärdet för odeformerade ryggkotor användes. Skillnader från genomsnittet aBMD för en ålders- och könsmatchad referenspopulation uttryckt som enheter av SD under eller över populationsmedlet ( Z- poäng) för aBMD beräknades. Ålders- och könsmatchade kontroller tillhandahållna av National Health and Nutrition Examination Survey (NHANES) III-studiegruppen för höft och av tillverkaren för ryggradens ryggrad. T-poäng uttrycker SD-enheterna under eller över det förväntade bentäthetsvärdet för en frisk ung vuxen av samma kön.

Volumetrisk BMD (vBMD) (g / cm3) vid L1-L4 beräknades utifrån benmineralinnehållet dividerat med ryggraden i ryggraden (VV). VV för L1 – L4 beräknades med användning av det projicerade området L1 – L4 erhållet av anteroposterior DXA och under antagande att ryggkroppen liknar en kub (VV = (anteroposterior area) 3/2 ). 18, 19

genotypning

EDTA-blod uppsamlades och DNA extraherades med användning av ett PUREGENE-DNA-reningskit (Gentra Systems). En genombredd kopplingsanalys utfördes med användning av 380 mikrosatellitmarkörer av ABI Prism Linkage Mapping Set MD-10 version 2.5 (Applied Biosystems). Ett förbättrat protokoll från 'Centre National de Génotypage' (Evry, Frankrike) användes för att samla i genomsnitt fyra markörer per PCR för att utföra alla reaktioner. Ytterligare markörer för mikrosatellit togs från Marshfield-kartan eller designades baserat på den enkla tandem-repetitionssökaren i University of California Santa Cruz genomläsare. Mikrosatellitmarkörer analyserades på en Applied Biosystems Prism 3100 Genetic Analyzer som kör Genemapper v2.0-programvara (Applied Biosystems).

Kopplingsanalys

Eftersom arvsmönstret för BMD med låg ryggrad i denna familj är mest tänkande för autosomal dominansliknande arv (figur 1), utfördes en parametrisk kopplingsanalys med användning av en påverkad / opåverkad egenskapsmodell. För att utföra kopplingsanalys efter affektionsstatus kategoriserades individer i två grupper. Den första gruppen består av "drabbade försökspersoner" som inkluderar sex individer (III: 5, III: 7, III: 8, III: 9, III: 13, III: 16) med kraftigt låg ryggrad aBMD (Z (aBMD) ≤− 2) och fem individer (II: 5, II: 7, II: 9, II: 16, II: 18) som behandlades med bisfosfonater på grund av en initial BMD-T-poäng ≤ − 2, 5 vid ryggraden och / eller höft. Den andra gruppen innefattar de "icke-drabbade" försökspersonerna som inkluderar nio individer (II: 15, III: 1, III: 2, III: 3, III: 4, III: 10, III: 11, III: 12, III: 14) med normal ryggrad aBMD (Z (aBMD) ≥ − 1) och fyra icke relaterade makar (II: 4, II: 10, II: 14, II: 17). Eftersom individerna I: 2, II: 1, II: 2, II: 3, II: 6, II: 11, II: 12, II: 13, III: 6 och III: 15 inte kunde tilldelas någon av dessa grupper de kodades som "fenotyp okänd" i kopplingsanalysen. Individer under 15 år ingick inte i genomfattande sökning.

Före kopplingsanalys kontrollerades genotypade markörer med avseende på Mendelianska inkonsekvenser med PedCheck-programmet. Tvåpunktsparametriska LOD-poäng beräknades med hjälp av Fastlink-programmet i Easylinkage-programvarupaketet. 20 En sjukdomsallelfrekvens på 0, 001 antogs eftersom familjärvning av allvarligt låg BMD är sällsynt i befolkningen och eftersom egenskaperna visar genetisk heterogenitet. Lika frekvenser för varje markörens allel antogs, eftersom befolkningsbaserade frekvenser inte var tillgängliga för alla markörer. En autosomal dominerande modell användes med en reducerad penetrans inom ett intervall från 0, 60 till 0, 90 och en fenokopihastighet på 2, 5%. En icke-parametrisk kopplingsanalys utfördes med användning av Genehunter v2.1r5 (Easylinkage) under antagandet av lika fördelning av markörallelfrekvenser och med användning av en S all poängfunktion för att fånga informationen om alleldelning mellan alla påverkade individer i stamtavlan. Haplotyper skapades med hjälp av programvaran Cyrillic 2.1.

Sekvensering av kandidatgener

Proteinkodande regioner och skarvplatser för kandidatgener WD upprepande innehållande protein 8 ( WDR8 ) och epidermal tillväxtfaktorliknande 3 ( EGFL3 ) amplifierades från DNA från drabbade familjemedlemmar II: 5 och II: 9 med användning av primrar utformade från intronisk sekvens intill till intron-exon-gränser eller exoniskt DNA när interna primrar krävdes för större exoner. Sekvenseringsreaktioner använde samma primrar som användes för PCR. Primersekvenser och PCR-villkor är tillgängliga på begäran. Sekvensreaktioner analyserades på en Applied Biosystems Prism 3100 Genetic Analyzer. Dessa sekvenser jämfördes med vildtypssekvensen som överlämnades till GenBank-accessionsnummer NM_017818 ( WDR8 ) och NM_001409 ( EGFL3 ). Sekvensvarianter, identifierade i individerna II: 5 och II: 9, analyserades i alla familjemedlemmar genom direkt sekvensering.

Statistisk analys

Korrelationer uppskattades med Pearson-korrelationskoefficienter. Skillnader i korrelationer bedömdes statistiskt signifikanta när P <0, 05. Statistiska analyser utfördes med användning av SPSS-programvaruversion 12.

Resultat

För att bestämma BMD-status i denna familj erhölls areal BMD Z- poäng för ryggrad, lårhals och total höft med hjälp av DXA (kompletterande tabell 1). Även om BMD Z- poäng på dessa olika skelettställen är starkt korrelerade ( P <0, 01), är segregeringen av svåra låga värden begränsad till BMD i ländryggen som sedan användes som fenotyp för att utföra kopplingsanalys. I den genombredda kopplingsstudien genereras den högsta tvåpunktsparametriska LOD-poängen på kromosom 1 vid markören D1S468 (LOD = 3, 07) för ett dominerande arvsmod med 70 eller 80% penetrans (tabell 1). Förutom D1S243, flankerande D1S468, överstiger ingen annan markör för kopplingsapparatssatsen tröskelvärdet LOD-poäng på 2, 2, förutsatt att en suggestiv koppling enligt kriterierna från Lander och Kruglyak. 21 Eftersom en genetiskt heterogen fenotyp som låg BMD gör det svårt att välja den exakta parametersatsen, genomfördes också en icke-parametrisk kopplingsanalys (NPL). Härmed identifierades samma region vilket gav ett minimum genombrett NPL P- värde ( P = 0, 0013) för markören D1S468 (tabell 1).

Full storlek bord

Rekombinationer mellan sjukdomen och markören D1S214 hos individerna III: 4 och III: 8 lokaliserar sjukdomsgenetomer till denna markör, medan rekombinationshändelser hos individer III: 11 och III: 12 placerar sjukdomens gencentromera till den ytterligare testade markören D1S243 (Figur 1). Haplotype-analys i denna familj indikerar att sjukdomsgenen troligen är lokaliserad mellan markören D1S214 och D1S243, ett intervall uppskattat till cirka 4, 75 Mb. I de fyra individerna som innehöll en kritisk rekombinationshändelse testades en ytterligare markör D1S2845 och fyra opublicerade mikrosatellitmarkörer i ett försök att begränsa kandidatregionen (figur 2). Rekombinationer vid μ sat1 och μ sat4 reducerade kandidatintervallet till 1, 2 Mb. Alla "drabbade" individer i denna stamtavla bär den länkade haplotypen som omger kandidatregionen. I alla "icke-drabbade" individer, med undantag för II: 15, är den länkade haplotypen frånvarande.

Image

Finmappning av kandidatregionen vid 1p36, 3 i fyra kritiska rekombinanter från den studerade familjen. Svarta staplar representerar den karakteristiska länkade haplotypen. Fasta och randiga horisontella linjer avgränsar respektive den största och minsta möjliga kandidatregionen.

Bild i full storlek

Kandidatregionen innehåller 19 gener enligt NCBI Genome Browser-databasen Build 36.2 i september 2006 (kompletterande tabell 2). Bland dessa valdes två kandidatgener för ytterligare mutationsscreening på grund av känd funktionalitet vid förvärv av ben eller expressionsmönster i benvävnad. Det WD-upprepande innehållande proteinet 8 visades uttryckas i ben och brosk och även i benbildande celler inklusive osteoblaster och kondrocyter, speciellt under endokondral ossifikation. 22 En annan positionskandidatgen kodar EGFL3. Det förutsagda EGFL3-proteinet innehåller 30 EGF-liknande domäner, varav tre är av den kalciumbindande typen och av vilka 23 innehåller ytterligare två cysteinrester inom det konsensus EGF-liknande motivet. 23 Den N-terminala delen av EGFL3 visar signifikant sekvenslikhet med fibrillin, i vilket mutationer är kända för att orsaka Marfan-syndrom, en sjukdom med viktigt skelettengagemang. Mutationsanalys av de kodande regionerna för WDR8 och EGFL3 i alla familjemedlemmar avslöjade inga genvarianter, som är unikt bosatta på den sjukdomslänkade haplotypen i denna familj (data visas inte).

De uppmätta aBMD-värdena, som används som fenotyp för den genombredda skärmen, är beroende av både benstorlek och verklig volumetrisk bentäthet. Därför, eftersom aBMD är en mätning som delvis påverkas av benstorlek, var det möjligt att våra kopplingsdata resulterade från skillnader i ryggradsstorlek mellan individer snarare än från variation i verklig volumetrisk bentäthet. Detta undersöktes vidare genom att beräkna volymetriska BMD: er (vBMD). Individer med nedre ryggrad Z (aBMD) hade också lägre vBMD (kompletterande tabell 1). Bestämningskoefficienten i regression ( r2 ) antyder att cirka 81% av variationen i Z (aBMD) i denna släde kan förklaras genom variation i vBMD.

Diskussion

En genomfattande genomsökning i denna stora familj med autosomal dominerande-liknande ärftlig låg ryggrad benmassa avslöjar ett enda, relativt litet kandidatintervall på kromosom 1p36.3. Till skillnad från de flesta genombredda kopplingsstudier för låg BMD, för vilket ett stort antal små familjer användes, undviker detta tillvägagångssätt baserat på en stor familj problemet med locus heterogenitet. Dessutom möjliggör denna strategi att avgränsa en kandidatregion genom att leta efter rekombinationshändelser. Kandidatintervallet 1, 2 Mb på 1p36, 3, för vilket antydande koppling för låg BMD vid ländryggen, tyder på att en enda huvudgen i denna region påverkar variationen i BMD starkt. Efter uppskattning av ryggraden vBMD-värden beräknades bestämningskoefficienten i regression ( r2 ) mellan Z (aBMD) och vBMD till 0, 81 i detta släkt. Detta indikerar att variation i Z (aBMD) huvudsakligen bestäms av variation i vBMD vilket leder till slutsatsen att den antagna huvudgenen till stor del påverkar vBMD snarare än benstorlek.

Alla "drabbade" individer i denna stamtavla är bärare av den länkade haplotypen på 1p36.3, medan alla "icke-drabbade" individer, förutom II: 15, inte har denna haplotyp (figur 1). Individuell II: 15, som bär den länkade haplotypen, bör därför betraktas som en icke-penetrerande individ. De individer i denna familj som ingen tillstånd status tilldelades visar varken vagn (II: 1, II: 2, II: 3) eller icke-vagn (I: 2, II: 11, III: 6, III: 15) för den länkade haplotypen. De mellanliggande ryggradens BMD-värden (−2

Eftersom endast suggestiv koppling hittades (LOD = 3.07) enligt kriterierna från Lander och Kruglyak (1995), kan det inte uteslutas att våra resultat berodde på en slump. Den möjliga förekomsten av falskpositiva resultat i kopplingsanalyser för osteoporoskänslighet illustreras av de inkonsekventa resultaten bland genomomfattande kopplingsstudier, som avslöjar många loci som kan innehålla gener som reglerar BMD. Endast få regioner har konsekvent kopplats till BMD i flera olika studier, det vill säga 1p36, 1q21-24, 4q31-34 och 12q23-24. 7 Således är den kromosomala regionen vid 1p36, identifierad i denna studie, en av de få regionerna som tidigare framkommit i flera andra kopplingsstudier för BMD (tabell 2). 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31 Detta stärker vår hypotes om att vi har identifierat verklig koppling. Nyligen avslöjade en metaanalys av Lee et al , 32 för att bedöma bevis för koppling av BMD över hela genomgenomsökningar, bland andra loci, starkt bevis på koppling för 1p36, även om detta lokus inte identifierades i en annan metaanalys som utfördes av Ioannidis et al. 33 Dessa skillnader beror sannolikt på användningen av olika studieutformningar. Lee et al 32 använde maximalt publicerade kopplingsresultat för alla skelettställen medan Ioannidis et al 33 analyserade hela genomdata för ländryggs BMD, femoral hals BMD och kön separat för att utföra deras metaanalys. Dessutom inkluderade båda studierna inte exakt samma genomfattande genomsökningar. Båda tillvägagångssätten, även om de genererar delvis olika kopplingstoppar, kan vara komplementära för att upptäcka loci som reglerar BMD över hela genomsökningsstudier. Kvantitativ karaktärslokalisering i djurmodeller gav ytterligare bevis för deltagande av en kandidatlokus för BMD på 1p36, vilket ledde till antagandet att stora reglerande gener delas mellan olika arter. Bouxsein et al 34 identifierade en kromosomal region på muskromosom 4, syntetisk till människa 1p36, som är förknippad med flera ryggradsben-trakulära egenskaper. Vidare identifierade Beamer et al 35 koppling till samma kromosomala musregion för ryggrad vBMD mätt med pQCT vilket är i enlighet med våra data att en genetisk defekt på 1p36 påverkar vBMD snarare än benstorlek. Alla dessa data stöder hypotesen att ett huvudlokal som kontrollerar BMD finns på kromosom 1p36. Detta lokus verkar ha pleiotropiska effekter på ben, vilket indikeras av de olika skelettställena som rapporterats vara kopplade till 1p36. Detta stöds ytterligare av resultaten från Karasik et al 29 (tabell 2), i vilken huvudkomponentanalys av flera BMD och kvantitativa ultraljudfenotyper (QUS) upptäckte 1p36 som en delad genetisk plats som bestämmer BMD-variation på olika skelettställen. I den familj som presenteras här påverkar den genetiska determinanten vid 1p36 också både höft- och ryggmärgs-BMD eftersom dessa mätningar är starkt korrelerade, även om ländryggraden påverkas hårdast. Även om vi har upptäckt samma kromosomala region som i flera tidigare kopplingsstudier på både människa och möss, betyder detta inte nödvändigtvis att vi plockar upp samma genetiska variant. Den mer allvarliga benfenotypen i denna familj, jämfört med de flesta tidigare kopplingsstudier, kan peka på förekomsten av en annan sjukdomsallel. De två sekvensbestämda kandidatgenerna, WDR8 och EGFL3 , verkade vara de mest lovande kandidaterna, baserat på publicerade uttryck och funktionella data, även om det inte finns några sjukdomar som orsakar sekvensvariationer för tillfället. Detta utesluter inte att mutationer är närvarande i icke-kodande regioner av dessa gener eller i andra gener i den avgränsade kandidatregionen. Därför pågår ytterligare studier för att identifiera den förmodade genen för den låga BMD-egenskapen i denna familj.

Full storlek bord

Sammanfattningsvis replikerades lokaliseringen av ett större lokus för BMD på 1p36.3 i denna studie, även om endast suggestiv koppling hittades. I denna enstaka utvidgade familj verkar denna genetiska faktor ha pleiotropiska effekter på ben och mest uttryckligen på ryggradens vBMD. Våra resultat öppnar perspektiv för ytterligare identifiering av en spinal BMD-bestämande gen i en relativt liten kandidatregion. För närvarande avslöjade emellertid sekvenseringsanalys av den kodande regionen hos kandidatgenerna WDR8 och EGFL3 inga mutationer eller sjukdomsassocierade polymorfismer.

anslutningar

GenBank / EMBL / DDBJ

  • NM_001409
  • NM_017818

Kompletterande information

Word-dokument

  1. 1.

    Kompletterande tabell 1

  2. 2.

    Kompletterande tabell 2

    Kompletterande information åtföljer uppsatsen på webbplatsen European Journal of Human Genetics (//www.nature.com/ejhg)