Utvärdering av effekt- och säkerhetsmarkörer i en fas II-studie av metastaserande kolorektal cancer behandlad med aflibercept i den första raden | brittisk journal för cancer

Utvärdering av effekt- och säkerhetsmarkörer i en fas II-studie av metastaserande kolorektal cancer behandlad med aflibercept i den första raden | brittisk journal för cancer

Anonim

ämnen

  • Kemoterapi
  • Kolorektal cancer
  • Fas II-studier
  • Förutsägbara markörer

Den här artikeln har uppdaterats

Abstrakt

Bakgrund:

Aflibercept (ziv-aflibercept) är ett anti-angiogeniskt medel som nyligen har godkänts i kombination med FOLFIRI för behandling av patienter med metastaserande kolorektal cancer (mCRC) som tidigare behandlats med oxaliplatin. Trots heterogenitet som svar på aflibercept har inga biomarkörer för effektivitet eller negativa effekter identifierats. Här presenterar vi biomarkördata från den randomiserade fas II AFFIRM-studien som bedömer aflibercept i kombination med mFOLFOX6 första raden i mCRC.

metoder:

Nittiosex somatiska mutationer i viktiga onkogena drivare av mCRC och 133 vanliga enkel-nukleotidpolymorfismer (SNP) i vaskulära endotelväxtfaktor (VEGF) -vägsgener analyserades och 27 plasmamarkörer mättes vid baslinjen, under och efter behandling. Vi bedömde korrelationer mellan dessa tre klasser av biomarkörer med progressionsfri överlevnad (PFS) och biverkningar (AEs).

Resultat:

Somatiska mutationer identifierade i KRAS , BRAF , NRAS , PIK3CA och PIK3R1 korrelerade inte signifikant med PFS (multipel testjusterad falsk upptäcktsfrekvens (FDR) eller multipel testjusterad FDR> 0, 3). Ingen av de individuella SNP: erna korrelerade med PFS (multipel testjusterad FDR > 0, 22), men på gennivåvariabiliteten i VEGFB korrelerade signifikant med PFS (multipel testjusterad FDR = 0, 0423). Även om ingen av plasmamarkörerna mätt vid baslinjen signifikant korrelerade med PFS, var höga nivåer av cirkulerande IL8 vid baslinjen tillsammans med ökade nivåer av IL8 under behandlingen signifikant associerade med reducerat PFS (multipel testjusterad FDR = 0, 0478). Ingen associering hittades mellan biomarkörer och AE: er.

Slutsatser:

Detta representerar den första biomarkörstudien i mCRC behandlad med aflibercept. Höga IL8-plasmanivåer vid baslinjen och efterföljande ökningar av IL8 var associerade med sämre PFS, vilket tyder på att IL8 kan fungera som en potentiellt förutsägbar biomarkör för resultatet av avliberceptisk behandling.

Huvudsaklig

Angiogeneshämmare har etablerats under det senaste decenniet som värdefulla verktyg för att hämma tumörtillväxt och förbättra tumörrespons på kemoterapi. Dessa inkluderar den humaniserade monoklonala antikroppen mot vaskulär endotelväxtfaktor (VEGFA), bevacizumab (Avastin; Bennouna et al, 2013) och det lösliga humaniserade chimära VEGF-receptor-fusionsproteinet, aflibercept (ziv-aflibercept; Van Cutsem et al, 2012; Chiron et al, 2014). Trots den signifikant förlängda överlevnaden som observerats med dessa angiogenesinhibitorer, undergår patienterna fortfarande för sin sjukdom, vilket antyder att hämning av en enda angiogen tillväxtfaktor ensam är otillräcklig för att inducera kärlnormalisering och stoppa tumörtillväxt. Faktum är att delmängder av patienter som behandlas med anti-angiogen behandling inte svarar, utvecklar gradvis resistens eller presenterar terapirelaterade biverkningar (AEs) (Jubb och Harris, 2010). Identifiering av potentiella biomarkörer som förutsäger svar på anti-angiogen behandling (Lambrechts et al, 2013) eller förekomsten av dessa AE: er är därför berättigade, eftersom det möjliggör ett bättre patientval för anti-angiogen terapi (Lambrechts et al, 2014; Schneider et al, 2014).

Aflibercept är ett anti-angiogeniskt medel, som nyligen har godkänts i kombination med FOLFIRI för behandling av patienter med metastaserande kolorektal cancer (mCRC) som tidigare behandlats med oxaliplatin. Godkännandet baserades på data erhållna från VELOR-försöket - en multicenter, randomiserad, placebokontrollerad fas III-studie, som jämförde effekten av aflibercept vs placebo i kombination med FOLFIRI-behandlingen som en andra rad behandling för patienter med tidigare behandlat mCRC med oxaliplatin (Van Cutsem et al, 2012; Joulain et al, 2013). AFFIRM, en öppen etikett, icke-jämförande, fas II-studie, genomfördes för att utvärdera kombinationen av aflibercept och modifierad FOLFOX6 (mFOLFOX6) som gavs som första linjeterapi hos patienter med mCRC (Pericay et al, 2012). Den primära slutpunkten var 12 månaders progressionsfri överlevnad (PFS), medan utforskning av biomarkörer var bland de sekundära målen.

I ett försök att förstå de nyckelfaktorer som är förknippade med effektiviteten och säkerheten efter avlibercept genomförde vi en undersökning som bedömde biomarkörer för afliberceptbehandling i prospektivt insamlade tumörvävnader och seriellt samplat plasma från patienter som deltog i AFFIRM-studien. Plasmaproteiner och genetiska varianter, som representerar antingen enkel-nukleotidpolymorfismer (SNP) i VEGF-vägsgener eller somatiska mutationer i viktiga onkogena drivare av mCRC, analyserades för att bedöma om de kunde förutsäga svar på aflibercept med avseende på PFS. Därefter bedömde vi också om någon av dessa markörer korrelerade med anti-angiogena läkemedelsinducerade AE, såsom gastrointestinal perforation, trombos, hypertoni och proteinuri.

Material och metoder

patienter

Den avsiktliga behandlingspopulationen innefattade 236 randomiserade patienter med mCRC randomiserade för att få antingen mFOLFOX6 plus 4 mg kg -1 IV efter varje andra vecka ( N = 119) eller mFOLFOX6 ensam ( N = 117). Patientkvalitetskriterier har tidigare beskrivits (Pericay et al, 2012). Studiens primära slutpunkt var att uppskatta PFS efter 12 månader. Sekundära mål inkluderade objektiv total svarsfrekvens, PFS, total överlevnad (OS) tid och säkerhetsprofilering (Ciombor et al, 2013). Svaret registrerades baserat på svarsbedömningskriterier i solida tumörer (RECIST, version 1.0). Patienter med AE: er definierades som att de upplevde händelsen minst en gång under studiebehandlingsperioden, och alla AE: er klassificerades med hjälp av Common Terminology Criteria for Adverse Events (CTCAE, version 3.0). Försöksprotokollet och genetiska biomarkörstudier godkändes av den institutionella granskningsnämnden på varje plats och var i enlighet med deklarationen från Helsingfors, US Food and Drug Administration Good Clinical Practices och lokal etik och juridiska krav. Alla patienter som ingick i denna studie gav skriftligt informerat samtycke för genetisk biomarkörtestning. ClinicalTrials.gov NCT00851084.

Somatisk mutationsval och profilering

Nittiosex hotspot-mutationer i åtta gener som ofta muterades i mCRC valdes från COSMIC-databasen (kompletterande tabell S1). Efter att tumörområdet markerades av en patolog extraherades tumör-DNA från tre formalin-fixerade paraffin-inbäddade tumörglas per patient som samlades in vid diagnostidpunkten med användning av Qiagen DNAeasy-kit (Qiagen, Antwerpen, Belgien). Mutationsprofilering utfördes med användning av Sequenom MassARRAY (Sequenom, San Diego, CA, USA) såsom tidigare beskrivits (Lambrechts et al, 2012; Zhao et al, 2014). Mutationer grupperades efter gen för att förutsäga effektivitet eller säkerhet.

SNP-urval och genotypning

Hundratåttiotre-taggning av SNP: er i VEGF-genvägar (Lambrechts et al, 2012) och fyra SNP: er som var kända för att vara förknippade med en ökad mottaglighet för högt blodtryck och trombos valdes (kompletterande tabell S2). Germline-DNA extraherades från perifert blod med hjälp av Qiagen DNAeasy-kit (Qiagen, Belgien) och genotypades med användning av Sequenom MassARRAY som tidigare beskrivits (Zhao et al, 2014).

Plasmaprofilering

Plasmakoncentrationen av 27 cytokiner, tillväxtfaktorer eller lösliga receptorer bestämdes genom enzymbundna immunosorbentanalyser (ELISA) med användning av två Fluorokine MAP-satser (den humana angiogenespanelen A och den humana cytokinpanelen med hög känslighet; R&D Systems, Abingdon, UK). Tävlingsexperiment genomfördes för att testa interferens av aflibercept med detektion av VEGFA, VEGFD och placental tillväxtfaktor (PlGF). Angiopoietin-2 (ANGPT2), SDF1- a , HGF, VEGFC, löslig VEGF-receptor 3 (sVEGFR3) och sVEGFR2 bedömdes med enstaka ELISA (FoU-system). Plasmamarkörer analyserades vid baslinjen, 30 och 60 dagar efter den första studien-infusionen och 30 dagar efter den sista aflibercept-infusionen.

Statistisk analys

Skillnader mellan patienter med utvärderbara biomarkörer och patienter utan utvärderbara biomarkörer bedömdes med hjälp av ett exakt test av tvåsidiga Fishers för kategoriska variabler och ANOVA för kontinuerliga variabler. Biomarkörer analyserades som kvantitativa variabler genom att koda frånvaron eller närvaron av en somatisk mutation som 0 eller 1, och SNP-genotyper som 0, 1 eller 2 beroende på antalet mindre alleler närvarande. De linjära effekterna av baslinjebiomarkörer på PFS bedömdes med hjälp av en Cox-proportionell riskmodell med följande samvariater: Eastern Cooperative Oncology Groups status (0–1 vs 2), lever-endast metastaser (ja / nej) och antalet av avlägsna metastasorgan (1 vs > 1), en behandlingseffekt, en biomarköreffekt och en biomarkör-behandlingsinteraktionseffekt. Betydelsen av de två senare effekterna testades gemensamt med ett Wald-test med två grader av frihet. Utökade statistiska metoder beskrivs i kompletterande metoder.

Resultat

Av de 236 patienterna i ITT-populationen i AFFIRM-studien var 227 (96%) utvärderbara för PFS. Av dessa tillhandahöll 130 (57%) minst ett biologiskt prov, varav 60 (46%) och 70 (54%) deltog i mFOLFOX6 respektive mFOLFOX6 plus aflibercept-armar. Det fanns ingen skillnad vid en P <0, 05 mellan patienter som tillhandahöll ett biologiskt prov och de som inte angav patientbiometri, etnicitet och sjukdomskarakteristika vid baslinjen, eller vid slutpunkterna för effekt och säkerhet (tabell 1). Av de som tillhandahöll minst ett biologiskt prov tillhandahöll 51 (39%) prover för var och en av de tre biomarkörtyperna, med 88 (68%) och 97 (74%) patienter som tillhandahöll prov för två respektive en av biomarkörtyperna . Varje biomarkörtyp analyserades separat för att undvika patientgrupper som var för små för delanalyser.

Full storlek bord

Somatiska mutationer och effekt

Somatisk mutationsprofilering utfördes på tumör-DNA erhållet från 93 av 227 (41%) patienter som var utvärderbara för svar, varav 47 (51%) hade behandlats med avlibercept. Medianmutationssamtal per patient var 96, 4% och 89 (96%) patienter hade en samtalshastighet> 80%. Mutationer detekterades i KRAS ( n = 31), PIK3CA ( n = 10), PIK3R1 ( n = 5), BRAF ( n = 3) och NRAS ( n = 3); 45 patienter bar endast vildtyp (wt) alleler, 44 patienter bar en enda mutation och fyra bar en mutation både i PIK3CA och KRAS . Vi bedömde effekten av genmutationsstatus på PFS, samtidigt som vi möjliggjorde interaktion med båda behandlingsarmarna. P- värden var lägsta, men inte signifikanta för KRAS ( ojusterad P- värde = 0, 0601; multipel testjusterad falsk upptäcktsfrekvens (FDR) = 0, 30; kompletterande tabell S3). Även om patienter som bär mutanta KRAS- tumörer uppvisade en något sämre median PFS när de behandlades med mFOLFOX6 jämfört med patienter som behandlades med mFOLFOX6 plus aflibercept (7, 7 mot 10, 1 månader), nådde detta inte betydelse (tabell 2). Det var inte heller någon effekt av RAS ( KRAS , BRAF och NRAS ) mutationsstatus på PFS (tabell 2).

Full storlek bord

Kärnlinje SNP och effektivitet

Germline-DNA var tillgängligt för 97 slumpmässiga patienter, av vilka 53 hade behandlats med aflibercept och var genotypade för 133 SNP.

Principkomponentanalys visade att genotypvarians delvis förklarades av ras (kompletterande figur S1). Eftersom andelen asiatiska patienter i AFFIRM var ganska stor (16 asiatiska vs 81 icke-asiatiska patienter) analyserade vi först SNP-data utan asiatiska patienter och genomförde därefter en känslighetsanalys genom att inkludera dem medan vi stratifierade för ras. Bland de 133 testade SNP: n fanns fyra SNP: er med P <0, 05 på PFS och ett multipel testjusterat FDR på 0, 22. En SNP var i VEGFB , som hämmas av aflibercept (rs3741403, P = 0, 0021), medan tre andra SNP var lokaliserade i EPAS1, (rs2346176, P = 0, 0051; rs4953344, P = 0, 0065; och rs2881324, P = 0, 0066; kompletterande tabell S4), som kodar för HIF-2alpha, en förmedlare av cellulärt svar på hypoxi. Dessa SNP: er uppvisade också de lägsta P- värdena när de inkluderade asiatiska patienter (kompletterande tabell S4).

De kombinerade effekterna av individuella SNP: er i en given gen undersöktes i en genvis analysförening. Av de 17 testade generna observerade vi en signifikant effekt för VEGFB , ( P = 0, 0025; multipel testjusterad FDR = 0, 0423; kompletterande tabell S5), i vilken tre SNP: er var genotypade, medan EPAS rankade andra (flera testjusterade FDR = 0, 1205). För att bedöma vilken kombination av SNP som stod för effekten på PFS, uppskattade vi haplotypfrekvenser bestående av rs3741403, rs1058735 och rs594942 (kompletterande tabell S6). Den vanligaste haplotypen i VEGFB , det vill säga TCC-haplotypen, valdes i en stegvis Cox-modell. Riskförhållandet för TCC-haplotypen var 0, 214, men interaktionen med behandlingsarmen valdes inte, vilket tyder på att den hade en prognostisk effekt.

Profilering av plasmamarkörer för effektivitet

Plasmanivåer med 27 markörer mättes vid olika tidpunkter (dvs vid baslinjen (87 patienter); 30 och 60 dagar efter behandlingsstart (82 och 73 patienter) och 30 dagar efter den sista behandlingen (56 patienter; kompletterande tabell S7 )). Vi bedömde föreningen mellan varje plasmamarkör vid baslinjen med PFS, samtidigt som vi möjliggjorde en interaktion med behandling (kompletterande tabell S8). Den lägsta P- värdet erhölls för IL8 ( P = 0, 0221; multipel testjusterad FDR = 0, 596 och P = 0, 0218 för interaktion) med en möjlig tröskeleffekt vid 19 pg ml 1 IL8 (tabell 1; kompletterande metoder).

Vi analyserade också om behandlingsrelaterade förändringar i plasmamarkörer kunde förutsäga behandlingsresultatet efter avlibercept. Cox-modellen inkluderade effekten av plasmanivåer i baslinjen och skillnaden i uttryck uppmätt vid baslinjen och den sista tidpunkten före avbrytande, sjukdomsprogression eller död (dvs vid 30 dagar eller 60 dagars behandling), medan det möjliggjorde interaktion med behandlingen ärm. IL8 var den enda markören med en signifikant effekt av förändring från baslinjen på PFS ( P = 0, 0018; multipel testjusterad FDR = 0, 0478; Tabell 3). I synnerhet motsvarade ökade IL8-nivåer med hög baslinje eller post-baseline en högre sannolikhet för sjukdomsprogression efter 12 månader (figur 1). En multivariat Cox-modell med lasso-straffning genomfördes för att kontrollera om ytterligare markörer i kombination med IL8-markör skulle förbättra förutsägelsen för PFS. Maximal sannolikhet uppnåddes inte genom korsvalideringsförfarandet (R-paketet straffat), vilket tolkades som ett misslyckande av ytterligare biomarkörer att bättre förutsäga PFS.

Full storlek bord

Image

Relation mellan IL8-nivåer och sannolikheten för sjukdomens progression. Avbildad är sannolikheten för sjukdomsprogression efter 12 månader i förhållande (vänster) till IL8-plasmanivåer vid baslinjen och (höger) till skillnaden mellan IL8-plasmanivåer vid baslinjen och vid den sista mätpunkten före sjukdomsprogression.

Bild i full storlek

Intressant nog visade vissa cytokiner betydande uttrycksförändringar efter behandlingsstart. Uttrycksnivåer dag 30 efter behandlingsstart jämfördes med baslinjen och på dag 60 till dag 30 efter behandlingsstart. Följande signifikanta förändringar detekterades efter FDR-justering i aflibercept / mFOLFOX6-armen (tabell 4): en minskning i löslig VEGFR3, en ökning i PlGF och en minskning i ANGPT2 (figur 2; kompletterande figur S2).

Full storlek bord

Image

Plasmanivåer av sVEGFR3 (A), PlGF (B), HGF (C) och ANGPT2 (D). Koncentrationer visas för mFOLFOX6-behandlade (vita) och mFOLFOX6 / Aflibercept-behandlade (grå) patienter vid baslinjen, 30 dagar efter den första studien infusionsbehandling, 60 dagar efter första infusionen och 30 dagar efter den senaste infusionen. Plasmanivåer för PlGF loggtransformeras för att möjliggöra visualisering av låga nivåer av PlGF.

Bild i full storlek

Plasmamarkörer korrelerade med säkerhetsändpunkter

Slutligen bedömde vi också vilken av dessa biomarkörer som korrelerade med någon av följande binära säkerhetsändpunkter (förekomst av en AE eller inte): hypertoni, proteinuri grad  2 (antingen härledd från laboratoriedata eller när nefrotiskt syndrom rapporterades som en AE), blödning eller venös tromboembolism. Patienter i den biologiska markörvärderingspopulationen exponerades något längre för behandling än patienter i befolkningen utan utvärderbara biomarkörer (medianantal cykler: 12 mot 9 eller 10), men det var ingen skillnad i exponering mellan båda behandlingsarmarna i den biomarkörvärderbara populationen ( Kompletterande tabell S9). Frekvensen för dessa säkerhetsändpunkter skilde sig inte signifikant mellan populationerna med och utan utvärderbara biomarkörer (tilläggstabell S10). Ingen effekt av någon typ av biomarkör (genmutationsstatus, SNP-genotyper, baslinjeplasmabiomarkörnivåer) på någon AE observerades vid en multipel testjusterad FDR-nivå under 0, 5 (kompletterande tabell S11). För varje plasmamarkör definierade vi också avgränsningsnivåerna som maximerar interaktionen med behandlingen. Den optimala avstängningen erhölls för HGF, vid en nivå av 1, 43 pg ml-1 (71: e percentilen). Även om hypertoni var starkt associerat med afliberceptbehandling (OR = 50, 4), utvecklade endast 20, 0% av patienterna med höga nivåer av plasma HGF (> 1, 43 ng ml −1 ) aflibercept-inducerad hypertoni i aflibercept / mFolfox6-behandlingsarmen, jämfört med 75, 8% av patienter med låga HGF-nivåer (<1, 43 ng ml −1 ; kompletterande tabell S12).

Diskussion

AFFIRM var en öppen etikett, icke-jämförande, fas II-studie som utfördes för att utvärdera kombinationen av aflibercept och mFOLFOX6 som gavs som första linjeterapi hos patienter med mCRC. Patienter som fick aflibercept i kombination med mFOLFOX6 eller mFOLFOX6 hade en 12-månaders PFS-hastighet på 25, 8% (95% Cl: 17, 2% –34, 4%) och 21, 2% (95% Cl: 12, 2% –30, 3%) (Pericay et al, 2012). Till skillnad från bevacizumab, som förlänger PFS vid kombination med mFOLFOX6, hade aflibercept inte någon signifikant effekt på PFS i denna studie. Det bör emellertid noteras att i AFFIRM mFOLFOX6-armen endast fungerade som ett internt riktmärke, eftersom provstorleken för studien inte möjliggjorde en tillräckligt kraftfull statistisk jämförelse mellan de två behandlingsgrupperna. Icke desto mindre gav denna studie en möjlighet att genomföra den första omfattande biomarkörsanalysen av aflibercept med hjälp av blod och arkiverad tumörvävnad som samlats in från deltagande patienter. Den mest relevanta upptäckten är att behandlingsresultat med aflibercept verkar vara oberoende av (K) RAS- mutationsstatus. Ur klinisk synvinkel är denna observation viktig eftersom aflibercept betraktas som ett andra behandlingsalternativ för patienter med mCRC som tidigare behandlats med oxaliplatin (Bennouna et al, 2013). I första raden kan många patienter ha behandlats med angiogenesinhibitorn bevacizumab i kombination med oxaliplatin (Van Cutsem et al, 2009). OS- och PFS-resultaten av bevacizumab vid behandling av patienter med mCRC anses vanligtvis vara oberoende av KRAS- genstatus (Petrelli et al, 2013; Sastre et al, 2013). Om de terapeutiska effekterna av aflibercept hade begränsats till antingen KRAS- wt eller mutanttumörer, skulle detta få viktiga konsekvenser för andra behandlingsalternativ, som anti-EGFR-behandlingar - som vanligtvis används som en andra- eller tredje-linjebehandling efter bevacizumab - rekommenderas endast i KRAS med tumörer (Brodowicz et al, 2013). Våra observationer bör dock tolkas försiktigt, eftersom AFFIRM var en icke-jämförande studie. Ändå är utvärdering av vårt resultat i ytterligare studier motiverat.

Studier tyder på att kemokiner och deras receptorer fungerar som viktiga reglerare för olika metastaserande och avancerade cancerformer (Coussens och Werb, 2002; Miles et al, 2013). Intressant nog identifierade vi att höga IL8-nivåer vid baslinjen korrelerade med kortare överlevnadstider och att patienter med ökande nivåer av IL8 under behandlingen var mer benägna att utvecklas. Detta antyder att patienter med höga IL8-nivåer, vid baslinjen eller under behandlingen, har en ökad risk för sjukdomsprogression under afliberceptbehandling. IL8: s och dess receptors CXCR1 och -2: s roll i tumörutveckling och progression är väl dokumenterad (Bennouna et al, 2013). Expression och utsöndring av IL8 genom tumörceller ökar proliferation och överlevnad genom autokrin aktivering och främjar angiogenes och neutrofil infiltration i tumören (Bennouna et al, 2013). IL8 bevarar också det angiogena svaret i HIF-1-alfa-bristfälliga tjocktarmsceller (Mizukami et al, 2005). Intressant nog, i en fas II-studie med 43 hepatocellulära karcinompatienter som fick bevacizumab (Boige et al, 2012), och en annan fas II-studie med 42 mCRC-patienter på bevacizumab (Kopetz et al, 2010), förutsåg förhöjd baslinje IL8 också kortare PFS-gånger. Likaså observerades lägre baslinjen IL8-nivåer av Abajo et al (2012) hos mCRC-patienter som svarade på en bevacizumab-innehållande terapi, medan Hayashi et al (2014) observerade ökade IL8-serumnivåer i icke-svarande mCRC-patienter som deltog i en fas 2 försök med FOLFIRI-kemoterapi plus bevacizumab. På liknande sätt korrelerade IL8-nivåer med OS i plasmaprover från mCRC-patienter som fick capecitabin, oxaliplatin och bevacizumab (Liu et al, 2013). En annan studie med avancerat hepatocellulärt karcinom fann att patienter med höga nivåer av IL8 också var förknippade med dåligt resultat (Zhu et al, 2009), medan i en fas 2-studie i urotehlial cancerökningar i IL8 efter 4 veckors behandling med pazopanib var associerade med en lägre svarssannolikhet (Necchi et al, 2014). SNP: er i IL8 och dess receptorer har också korrelerats med behandlingsresultatet av bevacizumab, vilket ytterligare belyser den potentiella rollen för IL8 när det gäller att förutsäga svar på anti-angiogena terapier (Schultheis et al, 2008; Lambrechts et al, 2013).

Dessutom sökte vi efter relativa förändringar i plasmamarkörer inducerade av afliberceptbehandling. Vi observerade en minskning av sVEGFR3- och ANGPT2-nivåerna, liksom en ökning av PlGF-nivåerna. För PlGF återspeglar ökningen troligen en uppreglering för att kompensera att det mesta av cirkulerande PlGF är bundet av aflibercept. Vi observerade inte en sådan kompensationsuppreglering för VEGFA. I detta avseende skiljer sig aflibercept med avseende på den konsekventa uppregleringen i VEGFA som observerats i de flesta bevacizumab-studier (Zhu et al, 2013). Avsaknad av en kompensatorisk uppreglering av VEGFA kan emellertid bero på interferens av aflibercept i ELISA-analysen. Faktum är att konkurrens ELISA-experiment för VEGFA, PlGF och VEGFD med aflibercept bekräftade att aflibercept starkt stör VEGFA, men inte PlGF- eller VEGFD-antikroppar som användes i MAP-satserna (kompletterande figur S3). Till skillnad från flera andra biomarkörstudier i mCRC som involverade bevacizumab-behandling såg vi inte någon förändring i sVEGFR2 efter afliberceptbehandling.

Slutligen observerade vi också att ANGPT2-nivåerna sjunker efter leverans av aflibercept. ANGPT2 är en utsöndrad faktor som binder det endotelcellspecifika receptortyrosinkinas TIE2 och har en komplex roll under angiogenes. ANGPT2 uttrycks starkt av tumörendotelceller, hämmar Tie2-aktivitet och destabiliserar blodkärl, vilket underlättar VEGF-beroende kärlstillväxt (Daly et al, 2013). Ändå visade tumörxenotransplantat behandlade med kombinationen av en ANGPT2-specifik antikropp (REGN910) och aflibercept reducerad tumörvaskularitet och tumörperfusion som var mer uttalad än med antingen enskilt medel, vilket resulterade i mer omfattande tumörcelldöd och mer potent hämning av tumörtillväxt ( Daly et al, 2013). På samma sätt har en human monoklonal anti-ANGPT2-antikropp en bredare antitumoraktivitet i kombination med VEGF-hämmare (Brown et al, 2010). Detta indikerar att ANGPT2 verkligen kan ha en skyddande roll i tumörendotelceller genom att aktivera TIE2, varigenom de anti-vaskulära effekterna av VEGF-hämning begränsas. Intressant nog rapporterade Goede et al (2010) att bland 34 mCRC-patienter som fick bevacizumab var låga pre-terapeutiska serum ANGPT2-nivåer associerade med en signifikant bättre svarsfrekvens, förlängd median PFS och minskning med 91% i risken för dödsfall. Å andra sidan, i tumörbiopsier som samlades in före och 12 dagar efter bevacizumab-monoterapi hos patienter i rektalcancer, var båda ANGPT1 och ANGPT2 båda nedreglerade i cancerceller. Våra data lägger därför till den växande rollen för ANGPT2 som en potentiell förmedlare av svar på anti-angiogen behandling.

Sammanfattningsvis presenterar vi här de allra första data som undersöker biomarkörer för afliberceptbehandling. Våra observationer för IL8, PlGF och ANGPT2 antyder att cirkulerande cytokinnivåer före terapi, såväl som deras förändringar under afliberceptbehandling, överensstämmer med dem som sågs för andra anti-VEGF-medel. I avvaktan på validering i andra aflibercept-innehållande regimer kan dessa undersökande biomarkördata vara användbara för att vägleda patientvalet i framtida studier med aflibercept.

Förändra historien

Kompletterande information

Word-dokument

  1. 1.

    Kompletterande information

    Detta arbete publiceras under standardlicensen för att publicera avtal. Efter 12 månader blir arbetet fritt tillgängligt och licensvillkoren växlar till en Creative Commons Erkännande-Icke-kommersiell-Dela Lika 4.0 Unported-licens.

    Kompletterande information åtföljer detta dokument på webbplatsen British Journal of Cancer (//www.nature.com/bjc)