Kliniska egenskaper, resultat och molekylprofiler för läkemedelsresistens vid tuberkulös meningit hos icke-hiv-patienter | vetenskapliga rapporter

Kliniska egenskaper, resultat och molekylprofiler för läkemedelsresistens vid tuberkulös meningit hos icke-hiv-patienter | vetenskapliga rapporter

Anonim

ämnen

  • Klinisk mikrobiologi
  • Tuberkulos

Den här artikeln har uppdaterats

Abstrakt

Tuberkulös meningit fortsätter att vara ett allvarligt problem för läkare eftersom det är svårt att ställa en tidig diagnos och konsekvenserna av att försena behandlingen är allvarliga. Syftet med denna studie är att tillhandahålla data för optimering av diagnostisk och snabb behandling av tuberkulös meningit. Av patienterna med 401 humant immunbristvirus (HIV) -negativ tuberkulös meningit i vår studie befanns 332 ha en nedsatt hjärnbarriär i blodet (82, 8%). Nästan 17, 0% av patienterna fick inte diagnosen i tid. Huvudvärk (53, 6%) och feber (48, 6%) var de vanligaste egenskaperna, och datortomografi / bild av magnetisk resonans (CT / MRI) upptäckte 96 patienter (23, 9%) med onormal meningealavbildning. Cerebrospinalvätskor realtidspolymeraskedjereaktion var positiv hos 73, 8% av patienterna med tuberkulös meningit, medan utstryk och kulturer upptäckte endast 6, 7% respektive 5, 2%. Ytterligare analys identifierade slående skillnader mellan läkemedelsresistent och läkemedelskänslig tuberkulös meningit. Patienter med läkemedelsresistens korrelerade med allvarlig prognos. Tuberkulös meningitdiagnostik bör övergripande innehålla kliniska symtom, laboratorie- och cerebrala avbildningsresultat, och mer känsliga diagnosmetoder är fortfarande motiverade. Våra data antyder cerebrospinalvätskapolymeraskedjereaktion för mykobakteriell DNA och molekylär läkemedels mottaglighetstestning som rutinanalyser för misstänkta tuberkulösa meningitpatienter, och observation av blodhjärnbarriärfunktionen kan utföras för individuell hantering.

Introduktion

Tuberkulös meningit (TBM) är den svåraste formen av tuberkulos (TB) och orsakar dödsfall eller allvarliga neurologiska defekter hos mer än hälften av de drabbade patienterna, trots framsteg i tillgängliga behandlingar mot tuberkulos 1, 2 . Tidig identifiering av TBM är avgörande för framgångsrik behandling. 3. Närvaron av samtidiga sjukdomar i TBM-patienter bidrar till mångfalden i patientens kliniska manifestationer och resultaten av laboratorieundersökningar av cerebrospinalvätska (CSF) och cerebral Computertomografi / Magnetic Resonance Imaging (CT) / MRI). Diagnosen av TBM förblir problematisk trots många betydande framsteg inom diagnostiska tekniker, och behandlingen har blivit mer utmanande på grund av uppkomsten av humant immundefektvirus (HIV) och läkemedelsresistenta stammar av Mycobacterium tuberculosis (MTB) 2, 4 . TBM fortsätter att vara ett allvarligt problem för läkare eftersom det är svårt att ställa en tidig diagnos och eftersom konsekvenserna av att försena behandlingen är allvarliga 4 . I avsaknad av en specifik objektiv diagnostisk metod baseras diagnosen TBM för närvarande huvudsakligen på klinikerens erfarenhet, icke-specifika symtom och en laboratorieundersökning 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12 . Därför är förståelse för egenskaperna hos TBM mycket viktigt för diagnosen av denna sjukdom. Nyligen har ett antal studier fokuserat på att beskriva etiologi, klinisk presentation och resultat av tuberkulös meningit i HIV-TB-infekterat TBM och TBM hos barn 13, 14 . Studier på HIV-negativa TBM-patienter, som representerar en speciell grupp TBM-patienter, har dock försummats, och uppgifterna har varit bristfälliga i flera år. Här presenterar vi 5 års data för icke-HIV-infekterade patienter diagnostiserade med TBM i sydvästra Kina. Vårt mål är att beskriva de kliniska egenskaperna, resultaten och molekylprofilerna för läkemedelsresistensegenskaper i denna speciella grupp.

Resultat

Kliniska egenskaper, laboratorietestresultat och prognoser hos HIV-negativa TBM-patienter i Kina

Totalt rekryterades 218 män och 183 kvinnor som var HIV-negativa TBM-patienter. Patientens ålder varierade från 11 till 84 år gammal, med en medianålder på 39 år. Av dessa hade 105 (26, 2%) patienter en historia av tuberkulosinfektion. I en klinisk undersökning klagade 53, 6% av patienterna huvudsakligen av huvudvärk, medan 48, 6% av patienterna klagade huvudsakligen på feber. Fysiska undersökningar avslöjade att 24, 9% av patienterna uppvisade tecken på meningealirritation, 26, 2% hade förändrad mentation och 25, 9% uppvisade förvirring. Förekomsten av alla andra symtom och tecken var mindre än 20%. Dessa symtom och tecken på TBM-patienter var emellertid atypiska och svåra att skilja TBM från andra neurologiska sjukdomar.

Endast 6, 7% och 5, 2% av de 401 patienterna hade syrasnabba positiva och kulturpositiva resultat i CSF-prover. Denna takt var lägre än de rapporterade i andra studier 7, 15, 16 . Den praxis att samla bara en liten volym CSF på vårt sjukhus kan delvis förklara dessa skillnader. Enligt British Infection Association (BIA) är den rekommenderade volymen av insamlad CSF för TBM-patienter 15–17 ml och den rekommenderade volymen för odling och färgning är 10 ml. Volymen som samlats in för CSF-analys på vårt sjukhus var endast 3-4 ml. Polymeraskedjereaktion i realtid (PCR) var mer känslig än konventionell smet och kultur för diagnos av TBM, med en positiv hastighet på 73, 8%, och tjänade som ett omedelbart och effektivt diagnostiskt komplementärt verktyg för MTB-detektering i CSF. CT / MR-resultat upptäckte 96 patienter (23, 9%) med meningeal förbättring, 69 patienter (17, 2%) med intracerebral tuberkulom och 47 patienter (11, 7%) med extrakraniell tuberkulosinfektion. Totalt dog 21 patienter. Åldrarna för dessa patienter sträckte sig från 12 till 64 år gamla, och 17 av dessa 21 patienter uppvisade CT / MRI-bevis som tyder på en diagnos av TBM, medan 14 av dem hade samtidig lungtuberkulos. De kliniska tillstånden hos 298 av patienterna (74, 3%) förbättrades, vilket indikerade att den terapeutiska strategin som användes för TBM var effektiv (tabell 1).

Full storlek bord

Undergruppsanalys resulterar i HIV-negativa TBM-patienter

Enligt metoderna enligt Thwaites et al. 17 och Marais et al. 18 delades patienterna in i tre grupper baserat på ålder (tabell 2). Patienter i grupp 1 var ≤15 år gamla, patienter i grupp 2 var 15 till 36 år gamla och patienter i grupp 3 var ≥37 år gamla. Det fanns 21 patienter i grupp 1, 155 patienter i grupp 2 och 225 patienter i grupp 3. Med avseende på kliniska symtom klagade 43, 1%, 40, 4% och 13, 3% av patienterna i grupp 3 av huvudvärk, feber och kräkningar respektive. Dessa procenttal var lägre än i grupp 1 och grupp 2 (p <0, 05 för alla). Det fanns meningealtecken hos 11, 6% av patienterna i grupp 3, vilket var lägre än 57, 1% av patienterna med sådana tecken i grupp 1 (p <0, 01) och 40% i grupp 2 (p <0, 01). Det extra meningeala TB svarade för 18, 1% av grupp 2, vilket var högre än procenthalterna i grupp 1 (0%, p <0, 05) och grupp 3 (8, 4%, p <0, 01). En bra återhämtning observerades hos 85, 8% av patienterna i grupp 2, vilket var bättre än 65, 3% av patienterna som upplevde en god återhämtning i grupp 3 (p <0, 01).

Full storlek bord

Enligt de riktlinjer som föreslagits av Marais et al. 18, klassificerade vi också 401 inskrivna TBM-patienter enligt deras diagnostiska poäng beräknade genom första undersökningsresultat efter införandet. I grupp 1 ansågs 8 patienter (38, 1%) ha definitivt TBM, 5 patienter (23, 8%) ansågs ha troligt TBM, 4 patienter (19, 0%) ansågs ha möjliga TBM och 4 patienter (19, 0%) ansågs inte ha TBM. I grupp 2 fanns 52 (33, 5%), 41 (26, 5%), 37 (23, 9%) och 25 (16, 1%) patienter i de definitiva, troliga, möjliga respektive inte TBM-grupperna. I grupp 3 fanns 71 (31, 6%), 61 (27, 1%), 54 (24, 0%) och 39 (17, 3%) patienter i de definitiva, troliga, möjliga respektive inte TBM-grupperna. Cirka 17, 0% av TBM-patienterna kan misslyckas med att diagnostiseras i tid och därför skulle de inte få lämplig behandling om kliniker fastställer diagnosen TBM baserat på endast symptom och tecken på meningit, laboratorieundersökningar av CSF och CT / MRI-resultat. Detta kan leda till en dålig prognos hos dessa patienter.

Kliniska egenskaper hos 35 fall med drogmottaglighetstest (DST)

Trettiofem patienter (19 män och 16 kvinnor med en medelålder på 42 år) togs slumpmässigt ur 401 TBM-patienter för MTBDRplus- och MTBDRsl-analyser, och 17 (48, 6%) av dessa patienter hade upplevt en tidigare TB-infektion. Som visas i tabell 3 var de vanligaste kliniska symtomen hos dessa 35 patienter huvudvärk och feber (77, 1%) följt av förändrad mentation (40%) och kräkningar (31, 4%). I den radiologiska analysen (CT / MRI) var meningealförstärkning (62, 8%) och tuberkulom (42, 9%) de vanligaste avvikelserna. Alla 35 patienter uppvisade negativa HIV-1-antikroppstestresultat. Totalt följdes 32 (91, 44%) av fallen och 27 (77, 14%) av fallen uppvisade en god återhämtning. Alla dessa data liknade uppgifterna för hela provet av 401 patienter.

Full storlek bord

Laboratorieundersökning av CSF hos HIV-negativa TBM-patienter i Kina

Enligt CSF-analyser detekterades ett ökat antal leukocyter, med en lymfocytisk övervägande av mer än 50%, en minskad glukoskoncentration och en markant ökad proteinkoncentration i CSF för de flesta av patienterna (tabell 4). Vi beräknade inte CSF-till-plasmaglukosförhållandet eftersom plasma inte samlades upp samtidigt med CSF. Av de 401 inskrivna TBM-patienterna som analyserats med Protis-programvaran i vår studie, visade sig 332 involvera BBB-försämringen.

Full storlek bord

I de 35 fallen som genomgick läkemedelskänslighetstestning (DST) var median CSF-öppningstrycket 170 cmH20 och 14 (40, 0%) hade ett ökat CSF-öppningstryck (> 200 cmH20). Median CSF: s totala leukocytantal var 140 × 10 6 / L, och 31 (88, 6%) av fallen hade ett ökat leukocytantal. Median CSF-glukosnivå i dessa 35 fall var 2, 1 mmol / L, och 26 (74, 3%) av fallen hade minskade glukosnivåer (0, 45 mg / dl). Median Cl-koncentration i 35 av fallen var 111, 4 mmol / l, och 28 (80, 0%) av fallen hade en minskad Cl-koncentration (<120 mmol / L) (tabell 4).

Totalt hade 23 av de 35 fallen ett CSF IgG-index och en CSF IgG-syntesgradsanalys. Av dessa hade 4 (17, 4%) fall ett CSF IgG-index som ökades, och 18 (78, 3%) fall hade en CSF IgG-syntesrate som ökades. Med hjälp av Protis-mjukvara fann vi att 22 (62, 9%) av de 35 fallen uppvisade BBB-skador, 4 (11, 4%) fall uppvisade ökade CSF IgG-syntesfrekvenser och BBB-skador, och 1 fall hade bara ökat CSF IgG-syntesgraden. Fenomenet med ökade CSF-IgG-synteshastigheter beräknade med användning av Protis-programvara skiljer sig från de rutinmässiga CSF-laboratorieanalyserna genom att det var BBB-skador i TBM. Resultat som beräknas med användning av Protis-programvara kan vara oroliga för att IgG som kommer in i CSF som ett resultat av skador på hjärnbarriären kan orsaka falska positiver i dessa fall.

Läkemedelsresistens för 35 TBM med DST

Såsom visas i tabell 5 uppvisade 14 (40, 0%) av fallen resistens mot ett eller flera läkemedel. Av dessa uppvisade 2 (5, 7%) fall monoresistens mot rifampicin (RFP) och 6 (17, 1%) fall visade monoresistens mot isoniazid (INH). Totalt fyra fall (11, 4%) var multi-läkemedelsresistent tuberkulos (MDR-TB), och ytterligare 2 fall uppvisade resistens mot mer än ett läkemedel.

Full storlek bord

Ytterligare analys av resultaten från genotypiska analyser indikerade att bland de analyserade mutationerna (tabell 6) stod mutationer vid rpoB-kodonerna 518–525 för 71, 4% av resistensen mot rifampicin och mutationer vid katG315 stod för 100% av resistensen mot isoniazid. Enligt MTBDRsl-analysen hade fallet som var resistent mot fluorokinoloner en genotyp av GyrA vid kodon 92–97, och 2 fall av resistens mot etambutol hade en genotyp av embB vid kodon 306.

Full storlek bord

Jämförelse mellan läkemedelsresistent TBM och läkemedelskänslig TBM

Såsom visas i tabell 7 uppvisade 13 (94, 1%) av de 14 resistenta fallen extra-meningeal TB, medan av de 21 känsliga fallen, endast en uppvisade extra-meningeal TB. En efterföljande analys av kliniska särdrag indikerade att 7 (50%) av de 14 resistenta fallen uppvisade kräkningar, medan endast 4 (19, 0%) av de 21 känsliga fallen rapporterade kräkningar (p <0, 05), vilket är förenligt med högt öppningstryck. Sammantaget förblev 4 (28, 6%) av de 14 resistenta fallen funktionshindrade, medan endast ett av de 21 känsliga fallen förblev funktionshindrade (p <0, 01).

Full storlek bord

Elva av de 14 läkemedelsresistenta TBM-patienterna (78, 6%) uppvisade högt öppningstryck, medan endast tre av de 21 läkemedelskänsliga patienterna (14, 3%) uppvisade högt öppningstryck (p <0, 01). Ingen signifikant skillnad observerades i andra jämförelser med avseende på laboratorieresultat från CSF.

Som en läkemedelsbehandling administrerades alla patienter Isoniazid + Rifampicin + Pyrazinamide + Ethambutol + Levofloxacin (HRZEO) kemoterapimetoder som en initial behandling. Två fall uppvisade ett dåligt svar på behandlingen och hade ändrat deras terapeutiska behandling. Båda dessa fall visade motstånd mot både RFP och INH. Läkemedelskänsliga TBM-patienter har inte ändrat sin terapeutiska behandling. Endast två patienter bland de läkemedelsresistenta TBM-patienterna hade ändrat sin terapeutiska behandling.

Jämförelse av kliniska särdrag, resultat av laboratorietester och prognoser mellan HIV-negativa TBM-patienter och TBM-patienter i en hög HIV-prevalensinställning

Vi jämförde våra resultat med Marais et al. 19 (tabell 8), en studie som fokuserade på TBM hos patienter med en hög HIV-börda. Det fanns signifikanta skillnader i neurologiska symtom, MRI / CT-abnormiteter och resultat mellan HIV-negativa TBM-patienter och TBM-patienter i en hög HIV-prevalensinställning (p <0, 05), med 25, 9%, 19, 5%, 6, 0% och 16, 0% av de HIV-negativa TBM-patienterna uppvisar förvirring, kräkningar, anfall och nackstyvhet respektive 53, 5%, 33, 3%, 13, 2% och 64, 0% av TBM-patienterna i en hög HIV-prevalensinställning som uppvisar samma symtom. Graden av MRI / CT-abnormiteter visade sig vara 4, 5% för hydrocephalus i våra resultat och 37, 5% hos dem enligt Marais et al. 17 (p <0, 01), och infarktgraden var 3, 2% i våra resultat och 40, 9% i Marais et al. 19 (p <0, 01). Dödligheten var 5, 2% hos HIV-negativa TBM-patienter och 37, 5% hos TBM-patienter i en hög HIV-prevalensinställning (p <0, 01). Dessa resultat indikerade att kliniska manifestationer, prognoser och avbildningsresultat skiljer sig mellan HIV-negativa TBM-patienter och HIV-positiva TBM-patienter.

Full storlek bord

Diskussion

Från vår statistiska analys av kliniska data såväl som tidigare studier, inser vi att diagnosen TBM hos barn och vuxna är en stor svårighet och kan döljas av dagar till veckor av icke-specifika hjärnhinneinflammationssymtom i tidigt stadium av sjukdomen. 20, 21 och den okänsliga konventionella CSF-kulturen och smetningsmetoderna 22 . Enligt de diagnostiska kriterierna som används för att bestämma diagnosvärdena i Marais et al. 18, som klassificerar fall som bestämda, troliga, möjliga eller inte TBM, mer information kan erhållas för att stödja en diagnos av TBM 18 . Tyvärr stödde ungefär 17, 0% av de bekräftade TBM-patienternas poäng en diagnos av TBM omedelbart enligt riktlinjen. När det gäller icke-odlingstester som CSF-PCR för mycobacterial DNA verkar bidra med tidig diagnos (78, 3% PCR-positiv i vår studie) av TBM. Dessa resultat tyder på att TBM bör övervägas hos alla patienter med hjärnhinneinflammationssymtom i områden med hög förekomst av tuberkulos, och kliniska, mikrobiologiska och cerebrala avbildningsresultat bör kombineras på lämpligt sätt för att stödja en diagnos av TBM. Det är värt att notera att en positiv CSF-PCR främjar förmågan att snabbt diagnostisera infektion med TBM. Genomförande av snabbare, ekonomiska och noggranna diagnostiska testmetoder kan leda till en tidigare diagnos och förbättrad terapeutisk framgång, vilket är särskilt viktigt för ett snabbt utvecklande allvarligt kliniskt tillstånd som TBM.

Tidigare bevis har visat att bland anti-tuberkulosläkemedel endast lipofila läkemedel som isoniazid och pyrazinamid kan tränga igenom blod-hjärnbarriären (BBB) ​​och nå CSF-koncentrationer som är aktiva mot MTB 23. I USA hittades 82, 8% av TBM-patienterna att ha en nedsatt BBB med hjälp av programvareanalys av Protis i vår forskning. HRZEO-cellegiftregim förblev effektiv för de flesta TBM-fall, vilket antyder effektiviteten av anti-TB-läkemedel såsom rifampicin och etambutol påverkat av permeabiliteten hos BBB och läckage av dessa läkemedel från plasma till CSF genom en ökad BBB-permeabilitet. Anpassningsmekanismer som leder till försämring av BBB och deras inflytande på antiterapi av TBM-patienter behövs för att undersökas ytterligare. Vårt resultat kan ge ny insikt i att bestämma mer effektiva behandlingsstrategier och optimala doser av läkemedlet mot tuberkulos för TBM-patienter, särskilt för yngre barn, som behöver noggrann observation för att uppnå relativ balans mellan minsta toxicitet och optimal terapeutisk effekt 24 . Framtida studier för att övervaka läkemedlets koncentration i CSF kommer att hjälpa till att modifiera sekventiella terapier.

Läkemedelsresistens i TBM är den primära faktorn som påverkar tuberkulosbehandlingen. I vår tidigare studie 25 fann vi att graden av MDR-TB var 32, 14% i 28 fall av TBM. I den aktuella studien visade dock 14 (40%) av 35 fall läkemedelsresistens och 4 (11, 43%) av 35 fall visade sig vara MDR-TB. Vi tror att det främsta skälet till skillnaden i MDR-hastigheter mellan våra experimentella resultat är den lilla storleken på våra prover, och den exakta MDR-TB-hastigheten berättigar till ytterligare utredning i ett större slumpmässigt populationsprov. Med avseende på de fenotypiska DST-resultaten var S522Q-mutationen i rpoB-genen och S315T-mutationen i katG-genen de två oftast observerade mutationerna bland multidrug-resistenta och monoresistanta stammar. Dessa resultat skiljer sig från vår tidigare rapport, som indikerade att S531L i rpoB-genen var den mest observerade mutationen 25 . Denna skillnad kan vara resultatet av en skillnad i homologi. I MTBDRsl-analysen observerade vi att i fluorokinoloner (FLQ) -resistenta prover var D93G-mutationen i GryA-genen den mest observerade mutationen, medan för ethambutol (EMB) var M306V-mutationen i embB-genen den enda observerade mutationen . Dessa resultat indikerar närvaron av antingen heterogena stammar eller blandade populationer av MTB, som alla tolkades som resistenta mot det relevanta läkemedlet. Ytterligare analys avslöjade att läkemedelsresistenta TBM-patienter hade en tendens till ogynnsamt svar på anti-TB-terapi och dålig prognos jämfört med läkemedels mottagliga patienter. Läkemedelsresistent tuberkulos, speciellt MDR-TB, var förknippad med långvarig och komplicerad behandling, dålig prognos och svår uppföljare 25, och det tar också en stor vägtull för patienter och medicinska arbetare 26 . Därför bör kliniker överväga möjligheten till infektion av läkemedelsresistent tuberkulos när TBM-patienter har ett tyngre, återkommande tillstånd eller varaktigheten av försenad läkning. Det är bättre att genomföra DST omedelbart. Och behandlingsmetoderna bör anpassas därefter.

Studien av Marais et al. 19 genomfördes i en hög HIV-prevalensinställning där 88, 3% av de inskrivna TBM-patienterna var smittade med HIV. Betydande skillnader konstaterades med avseende på neurologiska symtom, MRI / CT-abnormiteter och prognoser när vi jämförde våra resultat med de enligt Marais et al. 19 . Notera att negativa kliniska resultat var vanligare hos HIV-co-infekterade TBM-patienter. En stor mängd bevis har framkommit som tyder på att infektion med HIV spelar en viktig roll i patogenesen av TBM 14, 19, 27 . Dessa jämförda resultat verifierar denna synvinkel. Därför bör kliniker överväga en patients HIV-status vid diagnos och behandling av TBM.

Det finns vissa begränsningar för denna studie. Först var vår studie baserad i sydvästra Kina och fokuserade på HIV-negativ TBM, och våra resultat kanske inte är tillämpliga i andra regioner. För det andra, även om 401 patienter inkluderades i denna studie, var endast 35 patienter involverade i genotyp DST-analysen, och vissa signifikanta skillnader mellan grupper kanske inte har upptäckts under den statistiska analysen. Det är nödvändigt att samla mer fenotypiska och genotypiska data för läkemedelsresistens hos patienter med TBM från olika regioner för att få en bättre bild av läkemedelsresistensmönster i Kina. För det tredje måste data relaterade till läkemedelskoncentrationer samlas in för att mer fullständigt beskriva förhållandena mellan effekterna av anti-TB-behandlingar och BBB-permeabiliteten.

Sammanfattningsvis genomfördes den aktuella studien med användning av prover från TBM-patienter utan HIV-infektion. Våra data tyder på att TBM-diagnosen övergripande bör omfatta kliniska symtom, laboratorieundersökningar och fynd av cerebral avbildning. Bland laboratorietester uppnår molekylär diagnostik en snabb diagnos och relativt högre känslighet jämfört med konventionell utsmetning och kultur i CSF. De flesta TBM-patienter åtföljs av nedsatt BBB-status. Patienter med läkemedelsresistens och HIV-co-infektion kan lätt utvecklas till ogynnsam prognos. Vi rekommenderar att en molekylär DST-analys omedelbart begärs om ett positivt CSF-PCR-resultat erhålls och att BBB-funktionen bör analyseras bättre med avseende på individuell terapibehov.

metoder

patienter

Alla detaljer om studieutformningen och alla procedurer som var inblandade var i enlighet med Helsingforsdeklarationen. Informerat skriftligt medgivande erhölls från alla inskrivna patienter. Protokollen och förfarandena för skydd av mänskliga försökspersoner godkändes av etikkommittén på West China Hospital, Sichuan University (referensnummer 198 (2014)). Dessutom utfördes alla metoder i enlighet med de godkända riktlinjerna.

Från januari 2010 till september 2015 genomgick totalt 8164 fall av misstänkt hjärnhinneinflammation vid Västkinesiska sjukhuset vid Sichuan University en lumbal punktering (LP) och CSF-analys. Av dessa misstänktes 975 fall för att ha hjärnhinneinflammation baserad på CSF-avvikelser. Totalt diagnostiserades 401 fall (218 män och 183 kvinnor, medianålder = 39 år) med TBM. Trettiofem patienter (19 män och 16 kvinnor, medianålder = 42 år) med CSF-TB-DNA-positiva provtagades slumpmässigt och överlämnades till läkemedels mottaglighetstest (DST).

Rutiner

Alla patienter som vi registrerade genomgick en klinisk bedömning och fick blod för hematologiska och biokemiska tester. En lumbal punktering (LP) utfördes och CSF-cellantal och protein- och glukoskoncentrationer bestämdes med användning av rutinmässiga CSF-laboratorieanalystekniker (Modular P800; Roche Diagnostics, Basel, Schweiz). CSF centrifugerades, och en del av avsättningen undersöktes med användning av Gram, India-bläck och Ziehl-Neelsen-fläckar. Den återstående delen av provet odlades på blod och chokladagar för pyogena bakterier och på Löwenstein – Jensen-medium i flytande 7H9-medier (Mycobacterium Growth Indicator Tubes, Becton Dickinson Microbiology Systems, Sparks, MD) för mycobacteria. Patienterna genomgick också bröstradiografi och i fall som kliniskt indikerades utfördes en kraniell datortomografi eller magnetisk resonansavbildning.

Diagnostisk metod

En bestämd diagnos gjordes av neurologiska läkare om patienterna uppvisade typiska kliniska manifestationer av TBM och / eller patologiska förändringar i cerebrospinalvätska, inklusive ett positivt resultat i CSF i någon av följande tre undersökningar: en direkt syrasnabb bacilli (AFB) odling med flytande eller fast medium eller en nukleinsyraamplifiering, såsom PCR.

CSF-analys

De cellulära och biokemiska analyserna utfördes med rutinmässiga CSF-laboratorieanalysprotokoll (Modular P800; Roche Diagnostics, Basel, Schweiz).

BBB-funktionstest

Protis-programvara (Dade Behring Inc., USA), som kunde kombinera proteinanalytiska resultat med Reibergrams histogram 28, 29 och göra de analytiska resultaten mer intuitiva för användare, användes för att utvärdera syntesen av intratekalt immunglobulin och funktionen för blodhjärnbarriär. IgG-index, som beräknades som (IgG CSF / IgG Serum ) / (Alb CSF / Alb Serum ) och applicerades för att återspegla produktionshastigheten för intratekalt immunglobulin G (IgG), ökar vanligtvis signifikant i TBM 30 .

HIV-antikroppsdetektion

Närvaron av HIV-antikroppar i serumprover bestämdes med användning av en modulär analys E170 automatiserad immunanalysanalysator (HIV Combi; Roche Diagnostics).

MDR-TB-detektion

För CSF som testade positivt för TB-DNA extraherades DNA med användning av en NucliSens EasyMag (BioMerieux Lyon, franska) och matades sedan direkt in i en genotyp MTBDRplus och MTBDRsl-analys (BioMerieux Lyon, franska).

Statistisk analys

Kliniska och laboratoriefunktioner jämfördes. Vi använde ett diagnostiskt poängsystem som krävde närvaron av symtom eller tecken som tyder på hjärnhinneinflammation plus symtom härrörande från kliniska, CSF eller avbildningskriterier för att beräkna en patients poäng för varje funktion. Patienter flyttade sedan upp eller ner den diagnostiska pyramiden som visas i tilläggsfigur S1 online. när efterföljande resultat blev tillgängliga och klassificerades som bestämda, troliga, möjliga eller inte TBM enligt diagnostiska kriterier 18 . Antalet poäng som krävs för en diagnos av trolig tuberkulös meningit (≥12 när avbildning var tillgänglig eller ≥10 när avbildning inte var tillgänglig) och poäng som tilldelades i varje kategori bestämdes genom granskning av studier som kvantifierade diagnosbidraget för specifika variabler 18 . Annan statistisk analys utfördes av SPSS17.0.

Etiskt godkännande: Etiskt godkännande gavs av Clinical Trials and Biomedical Ethics Committee vid West China Hospital, Sichuan University (referensnummer: 198 (2014)).

ytterligare information

Hur man citerar den här artikeln : Zhang, J. et al. Kliniska egenskaper, resultat och molekylprofiler av läkemedelsresistens vid tuberkulös meningening hos icke-HIV-patienter. Sci. Rep. 6, 19072; doi: 10.1038 / srep19072 (2016).

Förändra historien

Kompletterande information

PDF-filer

  1. 1.

    Kompletterande figur S1

kommentarer

Genom att skicka en kommentar samtycker du till att följa våra villkor och gemenskapsriktlinjer. Om du finner något missbruk eller som inte överensstämmer med våra villkor eller riktlinjer ska du markera det som olämpligt.