Aditoprims antibakteriella aktiviteter och dess effektivitet vid behandling av streptokocker från svin | vetenskapliga rapporter

Aditoprims antibakteriella aktiviteter och dess effektivitet vid behandling av streptokocker från svin | vetenskapliga rapporter

Anonim

ämnen

  • Kliniska tester
  • Farmakologi

Abstrakt

Aditoprim (ADP) kan användas som ett antimikrobiellt medel hos djur. Emellertid har dess farmakodynamiska egenskaper inte systematiskt studerats ännu. I denna studie analyserades de in vitro antibakteriella aktiviteterna för ADP och dess huvudmetaboliter och den in vivo antibakteriella effekten av ADP för behandling av streptokocker från svin utvärderades. Det visades att Salmonella och Streptococcus från svin, Escherichia coli och Salmonella från kycklingar, E. coli, Streptococcus, Mannheimia, Pasteurella från kalvar, Streptococcus och Mannheimia från får och E. coli, Flavobacterium columnare, Acinetobacter baumannii och Yersin var mycket mottagliga för ADP. Haemophilus parasuis från svin, Staphylococcus aureus, Aeromonas punctate, Mycobacterium tuberculosis, Streptococcus agalactiae från fiskar, och Klebsiella från kalvar och får visade måttlig känslighet för ADP, medan E. coli, Actinobacillus pleuropneumonia, Pasteurfringingos, S. aure S. aureus, C. perfringens från kycklingar och S. aureus från kalvar var resistenta mot ADP. Huvudmetaboliterna för ADP visade lika aktivitet som hos deras moderförening, och de förebyggande och terapeutiska doserna av ADP som rekommenderades för streptokocker från svin var 10 respektive 20-40 mg / kg kroppsvikt. Denna studie visade först att ADP hade stark antibakteriell aktivitet och hade potential att användas som ett enda läkemedel vid behandling av bakteriella infektionssjukdomar.

Introduktion

Aditoprim (ADP, 2, 4-diamino-5- (4- [dimetylamino] -3, 5-dimetoxibensyl) pyrimidin), är en dihydrofolatreduktasinhibitor som hämmar omvandlingen av dihydrofolinsyra till tetrahydrofolic acid 1 . Den kemiska strukturen hos ADP liknar den för en annan 2, 4-diaminopyrimidin, trimetoprim (TMP), som visar hämmande aktivitet för de flesta gram-positiva aeroba kockor och Gram-negativa aeroba baciller, särskilt Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis , Group A beta -hemolytiska streptokocker, Streptococcus agalactiae, Streptococcus viridans, Streptococcus pneumoniae, Streptococcus faecalis, Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Enterobacter sp., Salmonella sp., Shigella sp., och Hemzail 2 .

Det finns dock färre studier på ADP: s farmakodynamik för närvarande. Tidigare studier har visat att ADP är ett brett spektrumläkemedel som uppvisar antibakteriell aktivitet mot många patogener från livsmedelsproducerande djur, såsom Haemophilus, Enterobacteriaceae, Aeromonas, Vibrio, Staphylococci, Streptococci, Acinetobacter och Alcaligenes (MICs ≤ 8 μg / ml, bestämd med användning av Diagnostic Sensitivity Test Agar) 1 . Den är mer aktiv än sulfametazin, sulfametazin-TMP-kombination och tetracyklin 1 . En annan studie med rörutspädningsmetod visade att MIC: erna för ADP varierade från 5 till 20 μg / ml och MBC: erna varierade från 320 till 1280 μg / ml till E. coli, Salmonella cholerasuis, Steptococcus, S. aureus och Pasteurella multocida (Li Shengbin, opublicerade data). Eftersom metoderna som användes för MIC-bestämning inte förenades från olika litteraturer är det svårt att jämföra resultaten horisontellt. Dessutom var slag och antal bakterier begränsade. Därför behövs det systematisk forskning om ADP: s farmakodynamik.

ADP har utmärkta farmakokinetiska egenskaper. Tidigare studier har visat att ADP har längre eliminationshalveringstider (3, 3 ~ 14, 8 timmar) och högre distributionsvolymer (4, 6 ~ 10, 4 l / kg) än de för TMP i gris, kalv, apa, får och vissa andra djurarter 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, och ett liknande mönster observeras för ADP där fördelningsvolymen är ungefär fyra gånger högre än för TMP. För den dåliga farmakokinetiken 18 och utvecklingen av antibakteriell resistens 19, 20, 21 används TMP ofta i kombination med sulfonamider som antibakteriell synergist för behandling och förebyggande av bakteriella infektioner i veterinärmedicin och humanmedicin 22 . Dessutom har den allmänna toxiciteten, mutageniteten, reproduktionstoxiciteten och teratogenicitetsstudierna av ADP visat att den visar låg toxicitet 23, 24 . Dessa fördelar gör ADP till ett lovande antibakteriellt medel inom veterinärmedicin.

ADP kan metaboliseras till 11, 9, 2 och 2 metaboliter i svin, slaktkött, karp respektive råttor, och N- monodesmetyl-ADP (A 1 ) och N- didesmetyl-ADP (A2) är de viktigaste metaboliterna i deras ätliga vävnader 25 . Hos får verkar A och A 2 också vara lika viktiga metaboliter 26 . Huruvida A 1 eller A2 har antibakteriella aktiviteter, vilket är viktigt för att formulera den kliniska doseringsregimen, har inte studerats.

Baserat på de relaterade riktlinjerna och standarderna för Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI), bestämde vi den in vitro antibakteriella aktiviteten för ADP, A 1 och A 2 och fastställde det antimikrobiella spektrumet för ADP omfattande och systematiskt i patogena bakterier från svin, kycklingar, fiskar, kalvar och får i den aktuella studien. Fas II klinisk prövning genomfördes också för att utvärdera effektiviteten av ADP vid behandlingen av streptokocker från svin. Den djupa kunskapen om ADP: s farmakodynamik kommer att lägga en solid grund för tillämpningen av ADP som ett nytt veterinärläkemedel.

Resultat

ADP: s antibakteriella aktiviteter in vitro och dess metaboliter

Som visas i tabell 1, 2 och 3 har ADP samma antibakteriella spektrum som TMP. Salmonella och Streptococcus från svin, E. coli och Salmonella från kycklingar, E. coli, Streptococcus, Mannheimia och Pasteurella från kalvar, Streptococcus och Mannheimia från får, och E. coli, Flavobacterium columnare, A. baumannii och Y. ruckeri från fiskar var mycket mottagliga för ADP (MIC eller MIC 50 <4 μg / ml). H. parasuis från svin, S. aureus, Aeromonas punctate, Mycobacterium tuberculosis och S. agalactiae från fiskar, och Klebsiella från kalvar och får uppvisade måttlig känslighet (MIC eller MIC 50 = 8 ~ 16 μg / ml), medan E. coli, A. pleuropneumonia, Pasteurella, S. aureus och C. perfringens från svin, S. aureus och C. perfringens från kycklingar och S. aureus från kalvar var resistenta mot ADP (MIC eller MIC 50 ≥ 32 μg / ml). Värdena på MBC / MIC var från 1 till 4 för ADP mot känsliga bakterier, vilket indikerade att ADP hade en bra bakteriedödande aktivitet.

Full storlek bord

Full storlek bord

Full storlek bord

ADP och TMP hade lika in vitro- aktivitet mot E. coli, Salmonella och Streptococcus från svin och F. columnare från fiskar. Salmonella från kyckling, E. coli, Streptococcus, Mannheimia och Pasteurella från kalvar, Streptococcus och Mannheimia från får, och E. coli, A. punctate, A. baumannii, M. tuberculosis, S. agalactiae, S. aureus och Y. ruckeri från fiskar var mer mottagliga för ADP än för TMP, medan MIC och MBC för ADP mot E. coli från kalvar och kyckling var något högre än för TMP.

För de fakultativa anaeroberna var MIC och MBC för ADP för en enda stam eller MIC 50, MBC 50, MIC 90 och MBC 90 för fler stammar lika eller skilde sig åt med endast en gradient (tvåfaldig) under de anaeroba och aeroba förhållandena, vilket indikerar att ADP också visade stark antibakteriell och bakteriedödande aktivitet mot fakultativa anaerober under anaeroba tillstånd.

Som visas i tabell 4 var MIC 50, MBC 50, MIC 90 och MBC 90 i A 1 och A 2 mot Streptococcus från svin och Salmonella från kycklingar lika med dem för moderläkemedlet ADP, från vilket vi kan dra en slutsats att ADP: s antibakteriella aktiviteter in vitro och dess huvudmetaboliter, A 1 och A2, är lika potenta.

Full storlek bord

Effektivitet av ADP vid behandling av streptokocker hos svin

Inga kliniska tecken på streptokocker sågs i någon av svinarna under acklimatiseringsperioden före infektionsutmaningen. Under behandlingsperioden återvände de genomsnittliga rektala temperaturerna hos grisar i högdosbehandlingsgruppen, behandlingsgruppen med medel dos och den positiva gruppen till normal nivå den andra dagen och medeltemperaturen i behandlingsgruppen med låg dos var tillbaka till normal nivå den tredje dagen, medan temperaturen i den negativa kontrollgruppen återgick till normal den nionde dagen (Fig. 1).

Det infekterade svinet behandlades en gång dagligen med indikerade doser av ADP eller förening Sulfadiazine Sodium (Positiv kontroll) från dag 0 till dag 5. De genomsnittliga rektala temperaturerna för den friska (tomma) och behandlade eller obehandlade (negativ kontroll) infekterade svin observerades och inspelad från dag 0 till dag 20.

Bild i full storlek

Alla svin i de infekterade grupperna uppvisade slapphet och aptitlöshet före sin första dos, medan ungefär 30% och 60% av svinet utvecklade haltande respirationssymptom. Tre svin i den negativa kontrollgruppen utvecklade symtom på att glida på dag 2 och dag 3 och dog sedan nästa dag. Obduktionsresultat visade en stor mängd svår fibrino-exsudation på serosa i lunga och njure, blödningspunkt i levern och mjälten och utvidgning av mesenteriska lymfkörtlar (kompletterande Fig. S1). Den histopatologiska studien avslöjade en hjärnneuronatrofi, minskad miltnodul, polycytemi och förekomsten av inflammatoriska celler och ett litet antal erytropoies i lungan. Modifierade partiklar av svullna hepatocyter och glomeruli hittades också såsom visas i tilläggsfiguren S2.

Tappar från mitten av lungskadorna från den döda svinen syntes alfa-hemolys på 5% fårblodagarplattor (Kompletterande Fig. S3A). Selekterad individuell bakteriekoloni bekräftades genom PCR, som visade 498 bp och 566 bp DNA-band motsvarande storleken på CPS-2J- och GDH-generna som är specifika för S. suis serotyp 2 respektive Streptococcus (tilläggsfigur S3B). Ovanstående resultat indikerade att döden av svin orsakades av S. suis- infektion.

Symtomen på de flesta svin i behandlingsgrupperna var tillbaka till det normala efter dosering av ADP på ​​dag 2 i högdosbehandlingsgruppen och medeldosbehandlingsgruppen och på dag 3 i föreningen Sulfadiazine Sodium-positiv kontrollgrupp och behandlingsgruppen med låg dos. Tre svin i gruppen med låg dosbehandling och en i behandlingsgruppen med medeldos uppvisade vanligtvis måttlig eller mild hosta och somnolens. Hosta noterades hos två svin i lågdosbehandlingen och en i medelhögdosbehandlingsgruppen. Den genomsnittliga ”kliniska poängen” per svin visades i Fig. 2.

Det infekterade svinet behandlades en gång dagligen med indikerade doser av ADP eller förening Sulfadiazine Sodium (Positiv kontroll) från dag 0 till dag 5. De genomsnittliga kliniska poäng för den friska (tomma) och behandlade eller obehandlade (negativ kontroll) infekterade svin var observerade och inspelade från dag 0 till dag 20.

Bild i full storlek

För att utvärdera den terapeutiska effekten av ADP på ​​streptokocker i svin gjordes en omfattande analys av hosta, mental tillstånd, kroppstemperatur och andra symtom hos varje grupp. Som visas i tabell 5 fanns det inga dödsfall i de tre ADP-behandlade grupperna, medan överlevnadshastigheten för den negativa kontrollgruppen var 70%. Högdosgruppen med ADP visade 100% effektivitetshastighet och härdningshastighet, medan både den effektiva hastigheten och härdningshastigheten för mellandosgruppen och den positiva läkemedelskontrollgruppen var 90%. Härdningshastigheten och den effektiva hastigheten för lågdosgruppen var 80% respektive 70% (tabell 5).

Full storlek bord

Kroppsviktema hos svin i varje grupp testades och jämfördes före och efter experimentet (tabell 6). Den relativa viktökningsgraden (RAW) för förening Sulfadiazine Sodium-kontrollgrupp (93, 0%) var mellan de i högdosbehandlingsgruppen (96, 5%) och behandlingsgruppen med medel dos (91%), utan signifikant skillnad mellan varandra (P> 0, 05). I lågdosbehandlingsgruppen var RAW 74, 7%, vilket är signifikant annorlunda jämfört med högdosgruppen och medeldosgruppen (P <0, 05). Svin i den negativa kontrollgruppen fick en genomsnittsvikt på endast 1, 77 kg med RAW på 34, 5%, vilket visade en signifikant skillnad med högdos-, medel- och lågdosgrupperna (P <0, 05).

Full storlek bord

Diskussion

Som ett nyutvecklande veterinärläkemedel har ADP visat sig vara lågtoxiskt och inte mutagent 23, 24 . Den uppvisar längre halveringstid hos djur än det representativa läkemedlet för 2, 4-diaminopyrimidiner, TMP, troligen på grund av dimetylaminogruppen, vilket är viktigt för förlängd eliminationsgrad i denna förening 27 . I denna studie undersöktes de antimikrobiella aktiviteterna hos ADP mot zoonotiska patogener systematiskt och jämfördes med TMP. Resultaten visade att ADP hade en liknande grad av antibakteriell aktivitet in vitro som för TMP. Många gram-positiva och gram-negativa bakterier är mycket mottagliga eller mottagliga för ADP, särskilt Salmonella och Streptococcu s, medan H. parasuis och Klebsiella var måttligt mottagliga för ADP. Tidigare studie visade att Pseudomonas aeruginosa, Campylobacter spp, Actinomyces och Clostridium spp. presenterade naturlig resistens mot TMP och ADP 1, vilket validerades i denna studie. Däremot är S. aureus resistenta mot ADP och TMP i vår studie, vilket kan bero på den enda mutationen (Phe98 till Tyr98) i dihydrofolatreduktaset hos S. aureus 28, 29, 30 . Intressant nog fann vi att ADP har antibakteriella aktiviteter med hög in vitro- aktivitet mot patogena bakterier från kalvar och får som baquiloprim 31 .

Antibakteriell resistens är ett allvarligt problem som hotar människors hälsa i nyare tid, så det är mycket viktigt för oss att förbättra den rationella användningen av läkemedel för att förhindra utveckling av resistens. Men vi förbiser ofta den antibakteriella aktiviteten hos läkemedelsmetaboliterna, vilket är en kritisk faktor vid formuleringen av doseringsregimen. Tolv metaboliter av ADP kan detekteras hos svin, slaktkött, karp och råttor, och A 1 och A 2, som upptog 11, 4% och 11, 8% hos svin, 12, 8% och 14, 0% hos slaktkött var de två huvudmetaboliterna i dessa ätliga vävnader 25 . I denna studie var in vitro- aktiviteterna för A 1 och A 2 på Streptococcus från svin och Salmonella från kycklingar lika med ADP. Därför kan vi ha en slutsats att ADP skulle uppvisa stark och långvarig antibakteriell aktivitet in vivo när A 1 och A2 beaktas.

TMP, med en kort halveringstid hos husdjur, uppvisar brister i att bibehålla tillräckliga plasma- och vävnadskoncentrationer, så det används ofta i kombination med sulfonamider 32, 33, 34, 35, 36, 37 . Till skillnad från TMP tillät de överlägsna farmakokinetiska egenskaperna hos ADP det som ett enda medel för terapeutisk applicering. I denna studie bestämdes den in vivo antibakteriella aktiviteten för ADP genom att utvärdera dess effektivitet i svin infekterad av S. suis typ 2 CVCC607, som är ett standardisolat och vars MIC är stängt för MIC 50 för ADP till S. suis . Eftersom det inte fanns någon rekommenderad dos av ADP i veterinärkliniken, fastställdes administreringsdos enligt ADF: s farmakodynamiska och farmakokinetiska egenskaper. Det är allmänt accepterat att för att uppnå en terapeutisk effekt, bör plasmakoncentrationen för ett antimikrobiellt vara högre eller lika med MIC för ungefär hälften av doserings-tidsintervallet för läkemedlet 38 . Baserat på MIC för ADP mot S. suis CVCC607 och de farmakokinetiska värdena beräknade efter injektion av ADP intramuskulärt (Du Xi, opublicerade data), sattes 10 mg / kg kroppsvikt, 20 mg / kg kroppsvikt och 40 mg / kg kroppsvikt som hög respektive medium och låg dosgrupp med administrering en gång dagligen.

Resultaten av förändringar i rektal temperatur, mental tillstånd, claudication och andningssymtom indikerade att alla dosgrupper av ADP visade terapeutisk verkan i viss utsträckning jämfört med negativ grupp. Effektiviteten hos högdosbehandlingsgruppen och behandlingsgruppen för medelhög dos var bättre än för lågdosbehandlingsgruppen, medan effektiviteten för behandlingsgruppen med medel dos var lika med den för den positiva kontrollgruppen. Därför är den terapeutiska dosen av ADP som rekommenderas för streptokocker från svin 20–40 mg / kg kroppsvikt, medan 10 mg / kg kroppsvikt kan användas för att förebygga eller befästa dess botande effekt. Eftersom 2, 4-diaminopyrimidiner ofta används som antibakteriella synerister, fanns ingen rekommenderad dos för monoterapi i kliniken. Den kombinerade dosen på 40 mg / kg kroppsvikt baquiloprim och sulfadimidin var den minsta rekommenderade dosen för användning som bolus i fältet 32 . Den orala suspensionen av TMP plus sulfadiazin administrerad med 24 mg / kg kroppsvikt två gånger dagligen behandlade effektivt de kliniska tecknen på S. equi subsp zooepidemicus lägre luftvägsinfektion hos hästar 33 . I denna studie är den kliniska effekten av enstaka ADP-beredning ekvivalent eller bättre än den för de andra 2, 4-diaminopyrimidinföreningsberedningarna.

Sammanfattningsvis har denna studie bestämt MIC och MBC för ADP mot vanliga patogener från svin, kycklingar, fiskar, kalvar och får och etablerat ADP: s antibakteriella spektrum. Det visas att ADP har en god antibakteriell aktivitet som är identisk med TMP, så gör dess huvudmetaboliter, A 1 och A2. Fas II klinisk studie av ADP på ​​terapeutisk effekt på streptokocker från svin har visat att ADP är lika aktivt som sulfadiazinförening, vilket ger en rimlig teoretisk grund för den kliniska tillämpningen av ADP. De övergripande in vitro- och in vivo- resultaten ger förutsägbara bevis på att ADP har hög antibakteriell aktivitet som kan användas ensam trots att vi jagar lämpliga mediciner för läkemedelskombinationer.

Material och metoder

Bakterie

E. coli ATCC25922, S. aureus ATCC29213, Enterococcus faecalis ATCC29212, Pseudomonas aeruginosa ATCC27853 och Streptococcus pneumonia ATCC49619 erhölls från America Type Culture Collection och användes som kvalitetskontrollstammar. Standardstammar såsom E. coli CVCC220, CVCC1496, CVCC1500, CVCC 1502, CVCC 1513, CVCC1519 och CVCC2083, Salmonella typhimurium CVCC542 och CVCC20CCCC3030 och CVCC20CCCC3030 och Clostridium perfringens CVCC1125, CVCC1160 (Peking, Kina). I denna studie användes också isolerade stammar från svin, kycklingar, fiskar, kalvar och får.

Djur och etiskt uttalande

Sextio tre veckor gamla svin som vägde 11 till 13 kg, som var helt friska utan historia av streptokocker, köptes från Jinlong Livestock and Poultry Co., Ltd (Wuhan, Kina). Djurhusen var bekväma med standardtemperatur och luftfuktighet. De var fria att få tillgång till vatten och matades med en kommersiell diet fri från antibiotika två gånger dagligen. All svin fick 7-dagars acklimatisering före studien. Alla djurförsöksförfaranden utfördes i enlighet med riktlinjerna och förordningarna från Animal Care Center, Hubei Science and Technology Agency i Kina (SYXK 2013-0044), och experimentprotokollen godkändes av etikkommittén vid Huazhong Agricultural University, Wuhan, Kina.

Kemikalier

ADP och dess metaboliter, A 1 och A 2, med kemisk renhet> 99% syntetiserades vid National Reference Laboratory of Veterinary Drug Residues, Huazhong Agricultural University (Wuhan, Kina). TMP köptes från China Institute of Veterinary Drugs Control (Peking, Kina). Sulfadiazine Sodium Injection köptes från Zhengzhou Bairui Animal Pharmaceutical Co., LTD (Zhengzhou, Kina).

Antimikrobiell känslighetstest

Minsta hämmande koncentration (MIC: er) av ADP och dess huvudmetaboliter bestämdes med buljongmikroutspädningsteknik enligt CLSI-riktlinjerna 39, 40, 41 . Minsta bakteriedödande koncentration (MBC) bestämdes enligt följande. Efter MIC-läsning pläterades 10 mikroliter av bakteriesuspension från brunnar där läkemedelskoncentrationerna var högre än MIC på agar och inkuberades över natten. MBC var den lägsta koncentrationen som kunde uppnå 99, 9% dödande av 42 . Med användning av SPSS 19.0 beräknades den minsta hämmande koncentrationen (MIC 50 ), den minsta hämmande koncentrationen av 90% (MIC 90 ), den minimala bakteriedödande koncentrationen (MBC50) och den minsta bakteriedödande koncentrationen (MBC 90 ).

Upprättandet av infektiös svin med Streptococcus

Enligt resultaten av antibakteriell aktivitet in vitro av ADP användes S. suis CVCC607 för att utvärdera den terapeutiska effekten av ADP på ​​streptokocker från svin. Svinet fördelades slumpmässigt i sex grupper (n = 10 för varje grupp). Tio friska svin inokulerades subkutant med 2 ml normal saltlösning och sattes som den tomma gruppen. Svin i de övriga fem grupperna ympades subkutant med 2 ml ymp innehållande 10 10 CFU S. suis CVCC607. Konstruktionen av modellen var framgångsrik när 70% av svinet fick de typiska symtomen på streptokock. För att förhindra korskontaminering inrymdes djur i sex olika försöksrum.

Behandlingsprotokoll

Behandling applicerades på streptokockcykosinfektionssvinmodell. Svin i gruppen med negativ kontroll kontrollerades utan läkemedelsbehandling och svin i gruppen med positiv kontroll behandlades med förening Sulfadiazine Sodium (30 mg / kg kroppsvikt). Svin i lågdosbehandlingsgruppen, behandlingsgruppen med medel dos och högdosbehandlingsgruppen behandlades med ADP-injektion i doser av 10 mg / kg kroppsvikt, 20 mg / kg kroppsvikt respektive 40 mg / kg kroppsvikt . Alla behandlingsgrupper administrerades en gång dagligen i 5 dagar och observerades i 15 dagar efter den första administreringen.

Kliniska observationer

Hälsobservationer som mentala tillstånd, aptit, rektal temperatur och andra kliniska symtom registrerades varje dag. Närvaron av slapphet, aptitlöshet, claudication och andningsorganisk abnormitet (hosta eller trasiga) bedömdes enligt följande för att göra en daglig ”klinisk poäng”. Andningstillstånd: poäng 0, normalt; poäng 1, ökad andningsfrekvens eller hosta ibland; poäng 2, magandning eller regelbunden hosta; poäng 3, visar tecken på svår dyspné. Psykiskt tillstånd: poäng 0, normalt; poäng 1, mild depression; poäng 2, vanligtvis liggande eller stående när mild stimulerad; poäng 3, håller på frambenen i sittande läge eller markant deprimerad. Botemedel definierades när rektaltemperaturen var under 39, 5 ° C och både mentaltillstånd och andetagstillstånd var ≤1, medan en medicinsk förbättring av sjukdomen ansågs vara effektiv 43, 44 .

Obduktion utfördes på de döda djuren. Vävnader fixerades med 10% formalin, dehydratiserades, nedsänktes i vaxet, skars i skivor och färgades med hematoxylin eosin för att observera de patologiska förändringarna av vävnader. Vattpinnar från centrum av lesioner strimmades på 5% fårblodagarplattor för att göra den bakteriologiska undersökningen. Valda individuella bakteriekolonier undersöktes med användning av primrar utformade för att amplifiera specifika gener (5′-TTTGTCGGGAGGGTTACTTG-3 ′ och 5′-TTTGGAAGCGATTCATCTCC-3 C för CPS-2J-gen; för GDH-gen) av S. suis serotyp 2 och Streptococcus för att säkerställa att dödsfallen orsakades av S. suis serotyp 2 infektioner. Dödlighet registrerades under hela experimentet och relativ viktökningsgrad (RAW) beräknades genom individuella kroppsvikt i början och slutet av studien.

Statistisk analys

MIC 50, MBC 50, MIC 90 och MBC 90 beräknades med användning av SPSS-programvara. Statistisk analys utfördes med Students t-test och Bonferroni-revision för att jämföra de kliniska variablerna före och efter behandlingen, och skillnader ansågs vara statistiskt signifikanta när p-värdet var mindre än 0, 05.

ytterligare information

Hur man citerar den här artikeln : Cheng, G. et al . Aditoprims antibakteriella aktiviteter och dess effektivitet vid behandling av streptokocker från svin. Sci. Rep. 7, 41370; doi: 10.1038 / srep41370 (2017).

Förlagets anmärkning: Springer Nature förblir neutral när det gäller jurisdiktionskrav i publicerade kartor och institutionella anslutningar.

Kompletterande information

PDF-filer

  1. 1.

    Kompletterande figurer

kommentarer

Genom att skicka en kommentar samtycker du till att följa våra villkor och gemenskapsriktlinjer. Om du finner något missbruk eller som inte överensstämmer med våra villkor eller riktlinjer ska du markera det som olämpligt.